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桉树是世界三大速生树种之一,原产于澳大利亚,已经成为我国南方地区发展速生丰产林的战略树种,是我国纸浆行业的主要原料。控制桉树的木质素含量对于提高纸浆生产率,降低污染有着重要的意义。本文研究农杆菌介导转化反义4-香豆酸连接酶(4CL)基因转化,以降低桉树中的木质素含量,建立了该基因转导桉树植株的技术体系,通过PCR检测鉴定到阳性的转化抗性愈伤组织,为今后进行桉树基因改良打下了良好的基础。通过组织培养的手段,以MS、1/2MS、WPM为基本培养基,利用6-BA、IBA、NAA等生长调节物质进行不同浓度及比例的组合,对以桉树叶片为材料进行愈伤诱导及植株组培再生系统进行了初步尝试,同时对桉树的外植体灭菌、增殖和生根进行了研究。经过对比实验,确定了外植体表面灭菌的最佳方法。使用两步灭菌方法,在外植体洗刷干净后首先使用70%乙醇溶液灭菌30s,无菌水冲洗三次后使用0.5%的次氯酸钠溶液灭菌6min;最佳分化培养基为MS + IBA 0.25mg/L + 6-BA 0.5mg/L +蔗糖30g/L +琼脂6g/L;生根培养基为1/2White + IBA0.5 mg/L +蔗糖40g +琼脂6g/L,生根苗移栽存活率达到90%以上;叶片愈伤诱导培养基为WPM+6-BA 0.1mg/L+NAA 3.0mg/L+蔗糖50g/L+水解酪蛋白1g/L+琼脂5g/L,愈伤率能够达到100%;愈伤组织在培养基WPM+6-BA 0.3mg/L+NAA 0.03mg/L+蔗糖50g/L+琼脂5g/L上培养能后诱导出不定芽。本实验同时对桉树遗传转化体系进行了研究,进行了桉树对卡那霉素的敏感实验,确定了抗生素筛选转化植株的敏感浓度。愈伤组织诱导、不定芽分化及生根培养分别使用30mg/L、60mg/L、80mg/L作为筛选转化植株的卡那霉素浓度。通过实验侵染实验对比转化率,确定农杆菌侵染桉树叶片的时间为8min,共培养时间为2d。对经过侵染和卡那霉素筛选的愈伤组织进行了PCR分子检测,结果显示有一个阳性样本。