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肾脏纤维化是多种慢性肾脏疾病最终导致肾衰竭的主要病理改变和共同通路。近年来研究表明,ASK-JNK通路参与了肾间质纤维化的发生,是细胞凋亡的重要途径。刺芒柄花素能够抗细胞凋亡,对肾脏起到保护作用。因此,本研究通过探讨刺芒柄花素对肾间质纤维化大鼠的作用及对ASK1-JNK生物学通路的影响,为寻找治疗肾间质纤维化的关键靶点提供新思路。(1)刺芒柄花素对肾纤维化大鼠的干预作用通过单侧输尿管梗阻建立大鼠肾间质纤维化的动物模型。与假手术组比较,模型组大鼠血清Scr、BUN显著升高(P<0.01),左侧肾脏直观观察肾脏体积增大且出现了明显的积液,皮髓质分界不清,肾重指数显著升高(P<0.01);苏木精-伊红染色法观察肾小管上皮细胞排列混乱无规则,肾小管损伤指数显著升高(P<0.01);Masson染色法观察肾组织大量纤维胶原增生;肾间质胶原相对面积显著升高(P<0.01)。与模型组比较,刺芒柄花素各剂量组以及依那普利组Scr、BUN显著降低。左侧肾脏肾盂积水程度有所减轻,肾重指数显著降低;肾小管轻度扩张、肾间质水肿较轻、肾小管损伤指数降低;胶原纤维表达相对较少,肾间质胶原相对面积显著下降。其中刺芒柄花素高剂量组与依那普利组比较,存在统计学差异(P<0.05)。(2)刺芒柄花素对肾纤维化大鼠ASK1-JNK通路调控机制在间质纤维化进展过程中,肾纤维化程度与肾小管上皮细胞凋亡数量呈正相关,凋亡数量越多,纤维化程度越重。研究表明,ASK1、JNK是凋亡过程中重要的蛋白。因此,本部分首先采用蛋白免疫印迹法考察刺芒柄花素对肾组织ASK1、JNK蛋白表达的影响。结果表明模型组较假手术组比,ASK1、JNK蛋白表达明显增加(P<0.01);与模型组比较,各治疗组均能够降低肾组织ASK1、JNK蛋白的表达(P<0.05、P<0.01);刺芒柄花素高剂量组与依那普利组比较,有统计差异(P<0.05)。再利用Tunel法考察刺芒柄花素对肾小管上皮细胞凋亡的影响。模型组与假手术组比较,凋亡的肾小管上皮细胞显著增加(P<0.01);与模型组比较,各治疗组凋亡指数明显减少(P<0.05、P<0.01);刺芒柄花素高剂量组与依那普利组比较,凋亡指数明显降低(P<0.05)。综上所述,刺芒柄花素能够保护肾间质纤维化大鼠的肾功能;减轻病变肾脏肾盂积水;减轻大鼠间质纤维化、肾小管上皮细胞空泡变性、间质浸润等从而降低肾小管间质损伤;减少大鼠肾脏中间质胶原纤维的合成及细胞外基质的过度沉积,阻碍肾间质纤维化的发展;干预ASK1、JNK蛋白的表达,从而抑制ASK1-JNK通路所介导的细胞凋亡通路,阻止肾小管上皮细胞凋亡所致的肾间质纤维化。