凋亡蛋白对人肝癌细胞系及相关基因表达影响的研究

来源 :哈尔滨工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:NobelHsu
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凋亡蛋白(Apoptin)又称"凋亡素"或"VP3",是病原微生物鸡贫血病毒基因VP3片段的蛋白产物.与其它病毒蛋白不同,凋亡蛋白只诱导肿瘤细胞或转化的细胞凋亡,而对正常体细胞没有影响.迄今为止,很多研究的重点都放在凋亡蛋白用于肿瘤基因治疗方面,而对于其基因水平的作用机制还不十分清楚.本文通过凋亡蛋白基因克隆,构建以绿色荧光蛋白为标记的融合表达载体,转化E.coli并提取携带凋亡蛋白基因的质粒转染HHCC(human hepatocellular carcinoma cell line)细胞,经显微镜观察并通过DAPI鉴定细胞发生凋亡后,提取总RNA反转录,与基因芯片杂交.比较系统地研究凋亡蛋白作用于肝癌细胞系HHCC后基因表达的变化,可以探索与凋亡蛋白作用相关的分子机制和可能的凋亡路径.对凋亡蛋白的研究既有理论意义又有实践意义.首先,在禽流感和SARS等种间传播疾病严重威胁人类健康的情况下,研究传染性鸡贫血病毒中的凋亡蛋白,也许具有未雨绸缪的意义.其次,本文不仅对凋亡蛋白的作用机制进行基础理论的研究和探讨,而且通过在基因水平对凋亡蛋白的选择性和专一性诱导肿瘤细胞凋亡的相关基因进行研究和分析,为药物筛选和肿瘤治疗策略提供了理论基础.此外,通过对凋亡蛋白作用机制的深入研究,为建立对环境中致癌物敏感的重组凋亡蛋白细胞系奠定了基础.目前,对环境和药物中致癌物检测办法主要有沙门氏菌和鼠微粒体法,但是由于种属差异不能更直接的反映致癌物对人的作用.通过凋亡蛋白对癌变的敏感性这个科学根据和本文对它作用机制的研究,为建立筛查环境中致癌物的重组凋亡蛋白细胞系统提供了基础理论的指导.
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