【摘 要】
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目的:探讨幽门螺杆菌(Hp)对人类胆管癌细胞增殖和凋亡的影响,以及该影响的细胞内信号转导途径。方法:用CCK-8(Cell Counting Kit-8)法和流式细胞仪法检测Hp对胆管癌细胞增殖,
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目的:探讨幽门螺杆菌(Hp)对人类胆管癌细胞增殖和凋亡的影响,以及该影响的细胞内信号转导途径。方法:用CCK-8(Cell Counting Kit-8)法和流式细胞仪法检测Hp对胆管癌细胞增殖,凋亡及细胞周期分布情况的影响,利用免疫细胞化学和凝胶电泳迁移率变动实验(EMSA)分析细胞核转录因子NF-κB在Hp作用前后的表达活化情况。再使用特异性NF-κB阻断剂吡咯烷二硫氨基甲酸酯(PDTC),阻断NF-κB的活化,利用细胞免疫化学技术和RT-PCR半定量技术分析比较抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-XL在转录因子NF-κB失活前后的表达情况。结果:在MOI值(细菌与细胞浓度比)为0.5:1的状态下, Hp对QBC939细胞有促增殖作用,第1,3天的增殖率分别为15.24%±4.2%、34.18%±2.6%,t检验P<0.05,具有统计学意义。在该MOI值时无诱导细胞凋亡作用,但可推动细胞周期的进展;在此过程中伴有细胞NF-κB活化和抗凋亡蛋白Bcl-2,Bcl-XL表达上调;PDTC阻断实验证明抗凋亡蛋白Bcl-2,Bcl-XL的表达受到NF-κB活性的调控。结论:幽门螺杆菌—核转录因子NF-κB—抗凋亡蛋白Bcl-2,Bcl-XL,这一传导通路的活化,在胆管癌细胞的增殖,凋亡及恶性转化中很可能具有重要作用。
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