【摘 要】
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目的观察电针刺激足三里穴对脓毒症大鼠肠粘膜机械屏障的改善作用并探讨作用机制。方法将大鼠(30只)随机分为假手术组(Sham)、脓毒症模型组(CLP组)、电针刺激组(EA组)各10只
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目的观察电针刺激足三里穴对脓毒症大鼠肠粘膜机械屏障的改善作用并探讨作用机制。方法将大鼠(30只)随机分为假手术组(Sham)、脓毒症模型组(CLP组)、电针刺激组(EA组)各10只。Sham组仅行开关腹手术,其他两组采用盲肠结扎穿孔法制作大鼠脓毒症模型。EA组于造模术复苏成功后于0、24、48h各行一次电针足三里穴位治疗,共3次,每次30分钟。术后48h处死各组大鼠,留取血标本,测血浆D-乳酸浓度;同时采集回肠粘膜标本,HE染色和透射电镜观察肠黏膜上皮细胞超微结构,免疫组化及western blot检测其肠上皮紧密连接occludin蛋白表达。比较不同组别大鼠血中D乳酸、Chiu氏肠粘膜损伤评分及肠上皮oclludin蛋白表达差异,分析各组回肠粘膜机械屏障损伤差异及针刺对脓毒症大鼠肠粘膜机械屏障的影响。结果1.CLP组大鼠术后第二天活动度明显下降,出现厌食、竖毛、眼球凹陷、呼吸急促、腹泻,对刺激反应迟钝。EA组上述情况表现轻微,有腹泻、竖毛等情况,但无明显厌食、呼吸急促,对外界刺激反应可。Sham组则无上述表现。48h大鼠死亡数统计:Sham组为0,CLP组3只(30%),EA组2只(20%)。2.Sham组的回肠黏膜上皮微绒毛排列整齐,上皮细胞紧密连接连续,各细胞器完整。CLP组回肠黏膜微绒毛破坏明显,细胞间紧密连接不连续、间隙增宽,微绒毛变细变短,部分断裂,线粒体严重肿胀,各细胞器受损严重。EA组回肠上皮细胞微绒毛排列基本规则,紧密连接连续,EA组与CLP组比较回肠黏膜损伤Chiu’s评分明显降低(P<0.05)。3.Sham组、CLP组和EA组大鼠血清D-乳酸分别为(1.58±0.11)mmol/1、(3.35±0.14)mmol/l 和(2.26±0.12)mmol/l,三组间差异有统计学意义(均P<0.05)。4.Sham组、EA组和CLP组大鼠肠粘膜上皮细胞紧密连接蛋白Occludin表达:免疫组化评分三组分别为9.43±0.73、7.29±1.46和5.57±1.34;Western blot检测三组分别为25.28±2.55、17.35±1.60、12.63±1.22;Sham组>EA组>CLP组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论电针刺激脓毒症模型大鼠足三里穴可明显降低其增高的血清D-乳酸水平,增加回肠粘膜上皮细胞紧密连接蛋白occludin的表达,以及改善其紧密连接结构,对肠粘膜机械屏障具有保护作用。
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