真核生物体内,F-box蛋白在泛素-蛋白酶体途径(ubiquitin-proteasomepathway,UPP)中参与调控胞内蛋白降解、受体识别、信号传导等生物学过程。F-box蛋白作为泛素连接酶复合物(Skp1-Cullin1-F-box,SCF)的调节亚基,参与降解底物的特异性识别。为探究F-box家族基因MoFbr7及MoFbc1在稻瘟病菌生长发育及侵染致病中的功能,本研究分别从稻瘟病菌中克隆了MoFbr7及MoFbc1基因并分别对其进行分析,现将主要研究工作和成果总结如下:1)对MoFbr7序列分析表明,该基因编码产物具有1个F-box结构域(N-端)和8个连续的WD40重复序列(C-端),在丝状真菌中高度保守。利用基因敲除方法,获得4个ΔMoFbr7基因敲除突变体,同时构建回补菌株。表型分析结果显示,ΔMoFbr7基因缺失突变体在干重、产孢量、附着胞形态、原生质体释放、致病性等方面均无异常。突变体在MM、RDC培养基上生长速率下降;对细胞壁胁迫因子CFW(Calcofluor white)、刚果红敏感。2)用生物信息学方法分析MoFbc1蛋白结构域,该基因编码1个F-box结构域(N-端)和 3 个UIM(The Ubiquitin Interacting Motif)结构域(C-端),并在丝状真菌中保守。利用同源重组方法获得ΔMoFbr7及MoFbc1基因敲除及其回补菌株并进行表型分析。ΔMoFbc1敲除菌株在干重、产孢、附着胞形成、原生质体释放及致病性等方面与野生型菌株均无显著差异。但其在MM和RDC培养基上生长速率下降,表明MoFbc1基因可能参与调控稻瘟病菌对部分营养物质的利用;突变体对细胞壁胁迫因子CFW、CR敏感,提示其细胞壁结构可能发生改变。以上结果表明MoFbr7与MoFbc1参与稻瘟病菌的营养生长与细胞壁完整性,为进一步揭示其生物学功能奠定基础。