研究背景前列腺癌（Prostate Cancer,PCa）是泌尿外科老年男性常见的恶性肿瘤疾病,在全世界范围内,男性所有恶性肿瘤中前列腺癌的发病率高居第二位^[1],其病死率位居第6位。在美国前列腺癌的发病率已经超过肺癌,成为第一位危害男性健康的恶性肿瘤^[2,3]。前列腺癌的发病率存在明显的地域和种族差异,亚洲及北非地区较低,澳大利亚、新西兰、加勒比海及斯堪的纳维亚地区的发病率最高^[1,4-9]。近年来亚洲国家前列腺癌的发病率呈现明显上升趋势,且增长比欧美国家更为迅速。在我国,超过60岁的男性前列腺癌发病率明显增高^[10],我国的前列腺癌发病率增高可能与我国社会老龄化程度的逐渐提高、饮食结构及生活习惯的不断改变、诊疗水平的不断提高等因素有关^[11]。早期前列腺癌预后良好。因为早期各种治疗都对其有作用,早期前列腺癌手术治疗可以达到根治的效果。诊断为T1,T2或T3期的PCa患者有较高的5年生存率,晚期前列腺癌5年生存率明显下降,T4期的患者5年生存率低于27%^[12]。值得关注的是全球因前列腺癌死亡的患者中有5%生活在中国^[10,13],其原因主要是中国近2/3的患者初诊时已出现局部的进展或远处转移,从而丧失了根治性手术治疗的机会,而在美国初诊时局限性前列腺癌病例占81%,出现淋巴结和远处转移的患者仅占12%和4%^[10,14,15]。从这一点来看,前列腺癌的早期诊断非常重要。前列腺癌早期缺乏特异性症状,当患者以下尿路梗阻而就诊时多数已发生转移。前列腺癌可以毫无症状地进展到不可治愈的阶段,能避免这种结果出现的唯一方法就是通过积极地筛查^[16,17]。目前临床工作中最常用的前列腺癌筛查手段为血液中前列腺特异性抗原（prostate specific antigen,PSA）检测,虽然PSA检测的临床广泛推广已经大大提高了前列腺癌的早期诊断率,但PSA特异性较低,从而导致前列腺穿刺活检结果阴性率较高,也使得重复穿刺的次数增加。尤其是PSA水平介于4¹0 ng/mL的人群,其前列腺穿刺活检的阴性率接近60%⁷5%^[18],增加了不必要的诊断性有创操作,结果是给患者带来伤害的可能性超过了预期的获益。PSA检测的不足之处促使人们尝试去寻找能弥补这些缺陷的前列腺癌的标志物^[19]。临床中急需一种简单的、高敏感性、高特异性的前列腺癌筛查指标,使其可以在很大程度上提高前列腺癌早期检出率,降低PSA检测的频率并减少额外的检测项目。Engrailed-2蛋白是由Engrailed-2（EN-2）基因编码的一类同源盒蛋白。1929年Eker教授首次在黑腹果蝇的自发突变中发现了Engrailed基因,Peel教授等人于2006年通过对EN基因的系统进化分析提出:EN基因作为一个保守的基因盒,存在于昆虫的整个进化过程中。人类EN-2基因位于染色体7q36。近年来发现在人类乳癌细胞中^[20]、肾透明细胞癌癌组织中^[21]、膀胱癌组织中^[22]也存在异常表达。EN-2很可能是多种肿瘤的潜在肿瘤标志物。血管内皮生长因子（VEGF）是促血管生成最重要的因子之一,许多研究证实,VEGF能特异性作用于血管内皮细胞,有效的促进血管内皮细胞的生长,加快血管生成速度,并能使新生血管的通透性增加,在肿瘤组织中,与肿瘤细胞的浸润和转移密切相关^[23]。本课题将Engrailed-2与VEGF联合起来共同研究,将两个重要蛋白关联起来,探索Engrailed-2与VEGF在前列腺癌组织中表达的特点及相关性,既丰富了前列腺癌肿瘤标志物检测的理论知识,又可为前列腺癌疾病的早期诊断与治疗提供新思路。研究目的1.Engrailed-2和VEGF在前列腺癌组织中表达的意义。2.Engrailed-2和VEGF与前列腺癌病人部分临床参数的关系。3.Engrailed-2和VEGF在前列腺癌中表达的相关性。方法收集郑州大学第一附属医院60例行前列腺癌根治术后或前列腺穿刺术后的前列腺癌组织,另随机收集同期45例良性前列腺增生的前列腺组织,采用免疫组化的方法分析EN-2蛋白和VEGF蛋白在前列腺癌与前列腺增生组织中表达的差异,并分析EN-2蛋白和VEGF蛋白与前列腺癌病人部分临床参数的关系。应用χ2检验、Spearman等级相关分析对结果进行统计学分析。显著性检验水准为p<0.05。结果1.免疫组织化学法显示:EN-2蛋白在前列腺癌组织中表达明显高于良性前列腺增生组织,主要见于前列腺腺上皮细胞的胞浆内。前列腺癌组织、良性前列腺增生组织中EN2蛋白表达阳性率分别为88.33%（53/60）和11.11%（5/45）,采用t检验分析,差异有统计学意义（P<0.05）。EN2在Gleason≥8分组与Gleason<8分组中的阳性率分别为97.30%（36/37）和73.91%（17/23）。差异有统计学意义（P<0.05）。在I+II组与III+IV组中的阳性率分别为76.92%（20/26）和97.06%（33/34）,差异有统计学意义（P<0.05）。在淋巴结阳性组与淋巴结阴性组的阳性率分别为100%（25/25）和76.19%（16/21）,差异有统计学意义（P<0.05）。在骨转移组与无骨转移组前列腺癌中阳性率分别为100%（13/13）和85.11%（40/47）,差异无统计学意义（P>0.05）。在大于70岁组与小于70岁组前列腺癌中阳性率分别为87.5%（14/16）和88.63%（39/44）（P>0.05）,差异无统计学意义。在吸烟组与不吸烟组的阳性率分别为90.63%（29/32）和85.71%（24/28）,差异无统计学意义（P>0.05）。在精囊腺受累组与无精囊腺受累组的阳性率分别为90.4%（19/21）和86.67%（26/30）,差异无统计学意义（P>0.05）。在切缘阳性组与切缘阴性组的阳性率分别为96.77%（30/31）和77.27%（17/22）,差异无统计学意义（P>0.05）。2.免疫组织化学法显示:VEGF蛋白在前列腺癌组织中表达明显高于良性前列腺增生组织,主要见于前列腺腺上皮细胞的胞浆内。前列腺癌组织、良性前列腺增生组织中VEGF蛋白表达阳性率分别为68.33%（41/60）、和26.67%（12/45）,采用t检验分析,差异有统计学意义（P<0.05）。VEGF在Gleason≥8分组与Gleason<8分组中的阳性率分别为78.38%（29/37）和52.17%（12/23）。差异有统计学意义（P<0.05）。在I+II组与III+IV组中的阳性率分别为46.15%（13/26）和82.35%（28/34）,差异有统计学意义（P<0.05）。在淋巴结阳性组与淋巴结阴性组的阳性率分别为96%（24/25）和66.67%（14/21）,差异有统计学意义（P<0.05）。在骨转移组与无骨转移组前列腺癌中阳性率分别为76.92%（10/13）和65.96%（31/47）,差异无统计学意义（P>0.05）。在大于70岁组与小于70岁组前列腺癌中阳性率分别为68.75%（11/16）和68.18%（30/44）（P>0.05）,差异无统计学意义。在吸烟组与不吸烟组的阳性率分别为68.75%（22/32）和67.86%（19/28）,差异无统计学意义（P>0.05）。在精囊腺受累组与无精囊腺受累组的阳性率分别为76.19%（16/21）和73.33%（22/30）,差异无统计学意义（P>0.05）。在切缘阳性组与切缘阴性组的阳性率分别为80.65%（25/31）和63.64%（14/22）,差异无统计学意义（P>0.05）。3.在60例前列腺癌组织标本中,EN-2和VEGF蛋白共同阳性表达有36例,EN-2和VEGF蛋白共同阴性性表达有2例;EN-2和VEGF蛋白的表达在前列腺癌中呈正相关性,r_s=0.784（P=0.004<0.05）。结论1.前列腺癌组织中EN2蛋白与VEGF蛋白都较良性前列腺增生组织高表达,EN2蛋白和VEGF蛋白与前列腺癌发生有关。2.EN2和VEGF与前列腺癌Gleason评分、临床分期、是否有淋巴结转移有关,与年龄、吸烟,切缘阴阳性无明显关系。可作为前列腺癌分期及预后的一个独立危险因素。3.EN2与VEGF在前列腺癌中的表达呈正相关,r_s=0.784（P=0.004<0.05）。