氢气饱和生理盐水对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用

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体外循环下的心脏直视手术会导致心肌缺血再灌注损伤。缺血的心肌在一定时间内恢复灌注后会经历一系列严重的毒性反应,称之为心肌缺血再灌注损伤。主要包括心肌顿抑、心律失常、再灌注性心肌不可逆的损伤和冠状循环障碍等。然而暂未有研究阐明缺血再灌注损伤的发生机制,目前研究认为缺血再灌注损伤与自由基、心肌纤维能量代谢障碍、细胞凋亡和钙超载等有密切关联。研究发现,氢气可有效地中和羟自由基及过氧亚硝基等阴离子。实验发现氢气可作为抗氧剂用于脑缺血所致的再灌注损伤。研究显示,静脉注射含饱和氢气的生理盐水对动物模型的心脏、肠道以及肺脏损伤均有明显的保护作用。本研究设计通过将氢气注入灌注液,观察心肌组织丙二醛(MDA)的含量,超氧化物歧化酶(SOD)的活性,左室收缩压(LVSP)和左室舒张末压(LVEDP)变化,左心室内压上升最大速率(+dp/dtmax)和左心室内压最大下降速率(-dp/dtmax)变化以及心肌超微结构的改变。为了更进一步的寻找缺血再灌注损伤保护作用的方法,将氢气饱和生理盐水早日应用到临床手术中提供充足的实验材料。目的:观察氢气饱和生理盐水对离体大鼠心脏MDA、SOD的影响,观察氢气饱和生理盐水对离体大鼠心脏血流动力学和超微机构的影响。探讨氢气饱和生理盐水对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法:1)48只大鼠随机分为实验组(24只)和对照组(24只)。2)对照组采用K-R液,实验组采用K-R液+氢气饱和生理盐水。处理后取出大鼠心脏并建立Langendorff模型,并将离体的心脏按逆灌注10 min,常温旷置20 min、再灌注20 min进行处理。3)检测丙二醛(malondialdehyde,MDA)及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)含量。检测左心室收缩压(LVSP)、左室舒张末压力(LVEDP)、左心室内压上升最大速率(+dp/dtmax)、左室内压最大下降速率(-dp/dtmax)。实验结束后,取下左心室后壁组织,立即用4%戊二醛溶液固定标本,在电镜下观察心肌细胞的超微机构的改变。结果:MDA增高以对照组缺血期最显著,且对照组缺血期和缺血再灌注期与实验组同期比较差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。对照组缺血期、缺血再灌注期与缺血前期相比有统计学意义(P<0.05)。实验组缺血期、缺血再灌注期与缺血前期无统计学意义。SOD活性实验组较对照组增强且具有统计学意义(P<0.01)。相对于对照组,实验组缺血再灌注期LVSP的下降程度明显减轻,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组缺血再灌注期LVEDP明显增高(P<0.05),实验组缺血再灌注期LVEDP较缺血前期无统计学意义,但与对照组同期比较下降明显(P<0.05)。相对于对照组,实验组缺血再灌注期±dp/dt的下降程度明显减轻,差异有统计学意义(P<0.05)。电镜下观察显示,心肌超微结构的损伤实验组较对照组明显减轻。结论:氢气饱和生理盐水对心肌缺血再灌注损伤具有明显的保护作用。减轻缺血再灌注的损伤,减少了氧自由基的形成,促进心功能恢复。稳定血流动力学,对心肌超微结构有显著的保护作用。
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