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目的: 研究S100A4基因在肾癌组织与正常肾脏组织中的差异表达,结合病理及临床资料明确S100A4基因表达水平与肾癌分化转移的关系,为肾癌侵袭转移的诊治提供依据。 方法: 选取我院2001年5月至2004年5月期间肾细胞癌根治性切除+系统性淋巴结清扫手术病例31例,取肿瘤及癌旁正常肾组织,采用Trizol裂解液(异硫氰酸胍一步法)按其操作规程快速分离组织和细胞的总RNA,5ulRNA加入逆转录体系中逆转录为cDNA,再将合成好的cDNA加至已加入S100A4荧光探针的PCR扩增反应体系中进行PCR扩增,将PCR产物直接进行微量荧光检测并计算S100A4荧光指数(S100A4荧光指数=肿瘤组织S100A4荧光值/癌旁正常肾组织S100A4荧光值);取5ul产物于1%琼脂糖凝胶中电泳,并在紫外投射反射以上观察结果、拍照。 结果: 将31例配对标本采用RT-PCR方法分别进行S100A4 mRNA荧光检测比较,29例标本肿瘤组织中S100A4基因mRNA表达明显高于癌旁正常肾组织;1例标本肿瘤组织与癌旁正常肾组织均有高的S100A4 mRNA表达。其中低分化肿瘤组病人的阳性表达率高于高分化组(7.94 vs 5.06,P<0.001);发生转移(包括淋巴结转移和远处转移)者高于无转移者(9.61vs 5.53,尸<0.001);低年龄组病人(延50岁)阳性表达率与高年龄组无明显差异(6 .31 vs 6.66,尸>0.05);肾颗粒细胞癌组与透明细胞癌组无明显差异(6.98 vs 6.02,P>0.05);肿瘤直径毛scm组与>scm组无明显差异(5 .95 vs 6.93,尸>0.05)。结论: 1.肾癌组织中5100A4基因mRNA表达明显高于癌旁正常组织,可 望作为肾细胞癌的病情发展及指导临床治疗的标记物之一。 2.肾细胞癌11级(低分化组)病人S10()A4基因mRNA阳性表达高 于肾细胞癌I级(高分化组)病人,故5100八沸基因表达与肾细 胞癌分化有关,癌组织slooA4 mRNA测定有助于判定肿瘤的预 后。 3.5100A4基因差异表达与肾细胞癌转移明显相关,发生转移患者 mRNA阳性表达率明显高于无转移患者,亦为肾癌根治性切除+ 系统性淋巴结清扫术这一术式提供了理论依据。 4.5100A4基因差异表达与肾细胞癌肿瘤大小,患者年龄、性别均 无明显相关性。