FGF3在正常和腭裂BALB/c小鼠腭突发育过程中的表达变化及差异

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目的:  利用维甲酸诱导BALB/c小鼠制作腭裂模型,观察FGF3在正常腭及腭裂组织发育过程中的表达变化及差异,探索其在腭发育中的作用。  方法:  选取 SPF级BALB/c 小鼠48只(雌鼠36只/雄鼠12只),按照雌雄3:1合笼交配。选取孕鼠随机分为RA组和玉米油对照组,每组各18只,在孕期第10天RA组以50mg/kg 的剂量管饲维甲酸,对照组以5ml/kg剂量管饲玉米油。两组分别于孕期12天、13天、14天及15天各杀死3只共24只孕鼠,取出胎鼠,制取头部标本,切片后分别行HE染色及免疫组化染色来观察正常腭及腭裂发育情况并检测FGF3的表达情况和差异。剩余每组各6只共12只孕鼠于孕期17天处死,剖宫取胎鼠,观察腭裂发生情况。  结果:  1. GD17杀死孕鼠共获得胎鼠75只,其中RA组36只,腭裂畸形鼠31只,发生率为86%;对照组39只,无腭裂个体。  2. HE染色结果显示:对照组小鼠腭突发育过程正常,GD13舌体下降,GD14腭突上抬至水平方向继续生长并开始接触融合,GD15基本融合完全,部分标本可见残余上皮缝;RA组小鼠GD14可见舌体下降延迟,腭突上抬障碍,GD15腭突发育瘦小,无法接触融合。  3. 免疫组化染色及平均光密度值比较结果示:FGF3仅表达在间充质细胞胞浆中,上皮带中无明显表达。对照组中FGF3均为阳性表达,GD13及GD14组染色较深,腭胚间充质细胞胞浆呈现明显的棕褐色;RA组GD14间充质细胞胞浆中未见明显染色,其余天数染色相比对照组均较浅,呈浅棕色。GD12、13、15对照组与RA组平均光密度值比较均有显著差异(P<0.05),对照组FGF3表达强于RA组。两组组内平均光密度值之间两两比较均有显著差异(P<0.05),对照组内FGF3在GD14表达最强,呈现先上升再下降趋势;RA组内FGF3在GD12表达最强,呈现先下降再上升趋势。  结论:  FGF3定位于腭胚间充质细胞中,自腭突萌出至融合时期均有表达,尤其在上抬和水平生长期呈现较强表达;腭裂组织中FGF3各时期的表达均弱于正常腭突,在上抬和水平生长期表现为较弱及阴性表达,由此推测FGF3促进腭胚间充质细胞的增殖,与腭突的发育具有相关性。
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