论文部分内容阅读
[目的]观察人参皂苷CK与顺铂联用对体外培养的人肺腺癌A549细胞株的抑制作用,并对其作用机制进行初步探讨。[方法]采用四甲基偶氮唑盐法（MTT法）测定人参皂苷CK和顺铂单用与联用不同药物浓度（人参皂苷CK:50μg/ml、25μg/ml、12.5μg/ml、6.25μg/ml、3.125μg/ml、1.5625μg/ml, DDP:20μg/ml、10μg/ml、5μg/ml、2.5μg/ml、1.25μg/ml、0.625μg/ml）、不同作用时间（24h、48h、72h、96h）及不同给药顺序（同时给药、先给人参皂苷CK24h后再给DDP、先给DDP24h后再给人参皂苷CK）对A549细胞的抑制作用,利用中效原理判定两药联用的效应；在倒置显微镜下观察A549细胞的形态学改变；应用流式细胞术进行DNA倍体分析和TUNEL分析,检测两药单用与联用对细胞周期及早期凋亡的影响；ELISA法检测细胞培养上清液中VEGF含量的变化。[结果] 人参皂苷CK和顺铂单用与联用的效应均呈浓度、时间依赖关系；两药大剂量联用时CI≈1,为相加效应,小剂量联用时CI>1,为拮抗效应；两药联用时对A549细胞的抑制效应与给药次序无关（P>0.05）；倒置显微镜下可观察到A549细胞的形态改变：细胞数明显减少,细胞体积缩小,细胞皱缩变形,脱落漂浮生长；流式细胞术显示两药联用时A549细胞出现明显的凋亡峰,S期、G2/M期细胞数减少,细胞周期被阻滞在G0/G1期,两药联用凋亡率高于单用人参皂苷CK或顺铂（P<0.05）；两药联用组细胞培养上清液中的VEGF低于单用人参皂苷CK或顺铂组（P＜0.05）。[结论]人参皂苷CK与顺铂大剂量联用对人肺腺癌A549细胞株的抑制效应为相加效应,小剂量联用时为拮抗效应；大剂量联用可明显诱导A549细胞凋亡、并减少其内源性分泌VEGF。