妇科Ⅱ号方治疗雌性小鼠生殖道解脲支原体感染的实验研究

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目的:通过阴道内接种感染解脲支原体血清型8(UU8)菌株,建立雌性小鼠生殖道UU感染的模型,观察UU感染后小鼠的整体状态和阴道、宫颈、子宫、输卵管病理形态学变化特点,以及中药制剂妇科Ⅱ号方对小鼠生殖道UU感染的治疗作用,探讨UU的致病机制,并为临床治疗女性生殖道UU感染提供行之有效的中药治疗方案奠定基础。方法:采用D. Taylor-Robinson等介绍的造模方法,选取7周龄BALB/c小鼠适应环境一周后开始实验,每周注射雌激素预处理,共4周,于第2次注射完雌激素3天后阴道接种UU8感染液,连续3天接种3次,感染的第7天加强接种1次。感染3周后确认造模成功与否,造模成功的小鼠随机分为3组:中药组、西药组、模型组,并开始给药治疗,三组分别妇科Ⅱ号方、阿奇霉素、等量生理盐水灌胃。用药两周后观察治疗结果。检测方法包括:液体培养法:用以检测阴道分泌物UU清除率;采用PCR定性检测小鼠阴道、宫颈、子宫、输卵管组织的UU清除率,并利用凝胶成像分析系统进行分析;形态学检查:观察小鼠整体状态、毛色以及阴道、宫颈、子宫、‘输卵管组织的外观、病理组织学变化;采用免疫组化法对细胞粘附分子(ICAM-1)进行测定。结果:1.通过阴道接种UU8型菌株,成功建立小鼠生殖道UU感染模型。2.下生殖道UU感染上行蔓延至子宫、输卵管,模型组小鼠整体状态较差。3.治疗后支原体清除率检测,包括液体培养法及PCR定性分析检测法。培养法结果示模型组小鼠全部为阳性,西药组小鼠全部为阴性,中药妇科Ⅱ号方治疗组小鼠UU转阴率可达到80%。PCR定性分析结果显示:西药组治疗后生殖道支原体转阴例数较中药组多,但差异无统计学意义。4.利用图像分析软件IPP6测量ICAM-1平均光密度进行定量分析示:阴道部位:中药组阴道部位ICAM-1平均光密度低于模型组,即中药组输卵管组织ICAM-1含量低于模型组。但两两比较,这两组差异无统计学意义。输卵管部位:中药组与模型组差异有统计学意义。中药组输卵管组织ICAM-1平均光密度值低于模型组,说明中药组输卵管组织ICAM-1含量低于模型组。其他部位差异无统计学意义(P>0.05)。结论:1.利用UU8型菌株阴道接种可以成功建立BALB/c小鼠生殖道支原体感染模型,其上行蔓延感染可引起盆腔炎性疾病,可为以后建立盆腔炎性疾病动物模型的实验研究提供相关依据。2.中药制剂妇科Ⅱ号方能够明显改善生殖道UU感染小鼠活动状态,治疗组整体病理损伤程度较模型组轻,如炎细胞浸润程度、腺体扩张程度,间质疏松水肿范围及程度等方面。西药治疗组同中药治疗组总体差别不大,西药组阴道及宫颈内炎性分泌物较少,子宫内膜组织疏松水肿及腺体扩张程度较轻,输卵管偶有纤毛倒伏及皱襞融合现象。中药组子宫腺体扩张表现不明显,以疏松水肿为主。3.妇科Ⅱ号方可以降低UU培养阳性率,但是与西药阿奇霉素相比差异无统计学意义,可能是由于样本量太少所致。4.妇科Ⅱ号方并且能够降低输卵管组织细胞粘附分子(ICAM-1)的含量,说明妇科Ⅱ号方应用治疗女性生殖道UU感染,能够调整生殖道局部免疫状态,有助于减轻炎性反应,为进一步研究UU对机体免疫系统的影响及中药对免疫系统的调节作用提供切入点。
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