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目的筛选鉴定电离辐射前后大肠癌细胞中差异表达的mi RNA;探究mi RNA-100在大肠癌组织及非肿瘤肠粘膜组织中的表达情况;过表达i RNA-100后对大肠癌细胞CCL244的放射敏感性的影响及机制研究。方法通过克隆形成实验筛选了七株大肠癌细胞CCL244、SW480、HT29、LOVO、HCT116、Hce8693、Ca CO2的放射敏感性。用二代测序法来监测X线照射48小时后大肠癌细胞HCT116和CCL-244中mi RNA的表达情况。筛选出照射前后在大肠癌细胞CCL244和HCT116中差异表达的Mi RNA。由于在辐射抵抗的肠癌细胞CCL244中mi RNA-100的照射前后表达差异最明显,所以选择mi RNA100作为本研究的对象。用Real-time PCR检测Mi RNA-100在大肠癌组织及癌旁组织中的表达情况。用mi RNA mimics转染CCL244以上调mi RNA-100的表达,转染后的细胞给予8Gy电离辐射照射后分别进行CCK8实验和克隆形成实验以检测上调mi RNA100对大肠癌细胞活性及存活率的影响。用mi RNA mimics转染CCL244以上调mi RNA100表达后给予0Gy和8Gy电离辐射照射后分别用流式细胞仪和Western Blot检测肠癌细胞凋亡情况及相关凋亡蛋白的表达情况。用mi RNA mimics转染CCL244以上调mi RNA100表达后给予4Gy X线照射后,分别于照射后0.5、2、4、8、16小时后收集细胞用免疫荧光技术检测上调mi RNA对电离辐射引起的DNA双链断裂的影响。上调mi RNA-100的表达后,Western Blot检测肠癌细胞中SMARCA5及EMT分子标记物Vimentin及ZEB1表达情况。利用免疫组化技术检测大肠癌组织芯片中SWI/SNF复合物的表达情况。结果克隆形成实验筛选出了七株肠癌细胞的放射敏感性,其升序是CCL-244,SW480,HT29,LOVO,Ca CO 2,Hce8693和HCT116。选取了放射抵抗的大肠癌细胞CCL244和放射敏感的大肠癌细胞HCT116作为本研究对象。mi RNA测序实验表明:与照射前相比,有33种mi RNA在CCL-244细胞中表达失调,其中13种mi RNA表达上调,20种表达下调;在HCT116细胞中,37中mi RNA显示表达失调,其中20种mi RNA表达上调,17种表达下调。其中差异最明显的是CCL244细胞中mi RNA-100在照射前后的表达。实时定量PCR结果表明:mi RNA-100在肿瘤组织中的表达低于正常组织(P<0.01)。CCK8实验和克隆形成实验表明:mi RNA-100表达上调后大肠癌细胞CCL-244的细胞活性显着下降(P<0.01),克隆形成率降低。流式细胞仪检测的细胞凋亡结果显示:上调mi RNA-100表达后增加了CCL244细胞电离辐射诱导的凋亡。Western Blot结果显示:上调mi RNA-100后促凋亡蛋白P53和caspase3的表达增加,抗凋亡蛋白Bcl-2和NF-Kb的表达减少。上调mi RNA-100后抑制SMARCA5及EMT分子标记物Vimentin及ZEB1蛋白的表达,相反,下调mi RNA-100后则会促进其表达。免疫荧光技术显示:上调mi RNA-100后能够显著增加大肠癌细胞由电离辐射引起的DNA双链断裂。免疫组化结果显示:SMARCA4,SMARCA5在肿瘤组织中高表达,在癌旁正常组织中低表达或无表达,而SMARCD1无论在肿瘤组织还是癌旁正常组织中均为低表达。结论本研究结果表明:mi RNA-100表达上调显着增加了CRC中CCL-244细胞的放射敏感性。mi RNA-100参与辐射诱导的细胞凋亡和CRC细胞的DNA双链断裂以及抑制EMT的发生可能是CRC放射敏感性增高的主要机制。mi RNA-100在肿瘤组织中的表达显着低于正常组织,这可能有助于研究mi RNA-100的致癌作用的潜在功能机制。本研究可能能够为大肠癌的放射治疗提供新的途径和方法。