PHA颗粒结合蛋白的表达、结晶与X射线衍射分析

来源 :清华大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:claverchou
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新型生物材料聚羟基脂肪酸酯(简称PHA),被称为“绿色塑料”,是细菌胞内积累的碳源和能源储存物,拥有生物可降解性、生物相容性、压电性等许多天然的优良性能。本研究的主要内容为:基于PHA 颗粒表面结合蛋白对聚酯生物合成起始过程的促进作用和稳定颗粒的功能,分别高效表达和结晶分析了位于聚羟基丁酸羟基己酸共聚酯(PHBHHx)颗粒表面的结合蛋白PhaPAh和PHB 颗粒结合蛋白PhaPRe;对高质量的大单晶PhaPAh进行了X 射线衍射分析。研究取得的主要结果: 1. 完成了两个不同种属(Aeromonas hydrophila 4AK4,Ralstonia eutropha H16) 来源的PHA 颗粒表面结合蛋白PhaPAh 和PhaPRe 的原核高效表达、蛋白质纯化与结晶优化实验; 2.获得了高质量的PhaPAh蛋白质大单晶,X 射线衍射分辨率达到2.8A|°,晶体空间群为P212121,晶胞参数为a =80.8|° , b =108.9|°, c =134.4|°, 晶体三维精细结构即将确定; PhaPRe晶体质量的改善还在进行中。
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