白鲢细胞色素P450(CYP3A137)的克隆及其表达研究

来源 :河南师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xllq
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
细胞色素P450是一类含有亚铁血红素的超家族单加氧酶,它参与许多外源物质(包括药物、环境化合物等)和内源性物质(如激素)的代谢转化。CYP3A是I相解毒酶系CYP450家族中的重要成员,在肝脏对外源毒物解毒和内源激素的代谢过程中发挥重要作用。本研究克隆了白鲢肝脏CYP3A137基因,并检测了利福平、毒死蜱和离子液体对其表达的影响。本研究中克隆了白鲢CYP3A137cDNA全序列,构建了CYP3A系统发育树,结果表明,白鲢CYP3A137氨基酸序列与其它鱼的CYP3A序列高度相似。生物信息学分析结果显示,白鲢CYP3A137cDNA序列全长1810bp,开放阅读框1539bp,编码513个氨基酸。CYP3A137蛋白质分子量为58.7995ku,理论等电点为7.96。该蛋白是一个稳定蛋白并具有一定的亲水性。二级结构预测可知,CYP3A137包含45.22%的α-螺旋、12.28%的延伸链,4.29%β-折叠和38.21%的无规则卷曲。具有2个显著的跨膜结合区。组织学分布检测结果显示,CYP3A137基因在白鲢的肝脏、肾脏、脾脏、脑、心脏、小肠、肌肉都有表达,表达量高低依次为肝脏>小肠>肾脏>脾脏>脑>心脏>肌肉。利福平对白鲢的毒性结果表明,以50mg·Kg-1和200mg·Kg-1利福平腹腔注射白鲢,均能诱导白鲢肝脏CYP3A137基因表达,且通过红霉素-N-脱甲基法检测50mg·Kg-1处理组在24h即能使CYP3A酶活性升高,200mg·Kg-1处理组在72h时CYP3A酶活性极显著高于对照组。结果表明,利福平能诱导白鲢肝脏CYP3A137表达。毒死蜱对白鲢的急性毒性结果表明,毒死蜱对白鲢属于高毒,96h LC50为0.172mg·L-1。根据半致死剂量选取0.017mg·L-1(1/1096h LC50)和0.103mg·L-1(3/596hLC50)浓度组毒死蜱暴露白鲢,24h后取肝胰脏,提取RNA,通过荧光定量PCR检测CYP3A137基因的表达情况,结果表明毒死蜱对白鲢的CYP3A137基因表达有明显抑制作用。离子液体[C8mim]Br对白鲢的急性毒性结果表明,离子液体对白鲢属于低毒,72hLC50为218.52mg·L-1。根据半致死剂量选取22mg·L-1(1/10LC50)和109mg·L-1(1/2LC50)浓度组[C8mim]Br对白鲢染毒,24h、72h取肝胰脏,提取RNA,通过荧光定量PCR检测CYP3A137基因的表达情况,通过红霉素-N-脱甲基法检测CYP3A酶活性。结果表明,[C8mim]Br对白鲢的CYP3A137基因表达水平有明显的诱导作用,且能使CYP3A酶活性升高,[C8mim]Br可能是CYP3A137的作用底物。
其他文献
引言太阳能是最好的清洁能源之一.在各种太阳能电池中,网络互穿结构的体异质结(BHJ)太阳能电池被证实是十分高效的器件.其活性层材料中的给/受体材料发展是最核心的部分,受体
表面活性剂在现代工业、农业、环保领域和日常生活中扮演着重要的角色.在生物体内,表面活性剂可改善疏水分子的水溶性和生物相容性,提高微生物群落的流动性,形成生物膜组织以
在全国新闻战线广泛开展的“走基层、转作风、改文风”活动,确实给新闻界带来了一缕春风,亮点、热点纷呈,社会反响热烈。回顾两年来的此项主题活动,我们仍然能从捷报频传的表
二缩三乙二醇双β-(3-叔丁基-4-羟基-5-甲基苯基)-丙酸酯(简称抗氧剂245)是近年来开发的一种非对称型受阻酚类抗氧剂,与聚合物树脂的相容性好,抗氧效能高等优点。本文以2-甲基-
本文对体外诱导孤雌胚胎干细胞向生殖细胞分化问题进行了研究。随着社会压力的增加、环境的恶化,人类的生殖健康情况越来越引起人们的关注。现实问题迫使许多女性选择晚育,而女
多吡啶钌络合物是一类具有独特的光化学、电化学、磁性质以及较高的催化活性的多功能基团.由于性能的多样性,其在光电转换、远程电子能量传递、分子电子器件、自组装过程等材
我矿圆锥破碎机采用绕线式异步电动机拖动,电机型号为:YRKK4003-6,功率220kW,定子电压6kV,电流为27A,转子电压363V,电流380A。转速为984r/min。为获得良好的启动及运行特性,
引言被称为"百草之王"的人参是东北三宝之一,也是珍贵的药材和保健品,具有抗肿瘤、抗衰老、改善记忆、抗炎及保肝脏、提高免疫功能等作用[1].人参栽培周期长,管理成本较高,病
期刊
超分子聚合物是通过定向可逆的非共价键相互作用所形成.与共价键连接的聚合物相比,超分子聚合物具有简单易得、方便修饰等多方面的优势,因此受到化学家们的广泛关注.