阿尔茨海默症(Alzheimer’s Disease,AD)是影响全球数百万人并与年龄有关的神经性疾病。其主要的病理标志特征是β-淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)的沉积和tau蛋白的过磷酸化,分别形成细胞外斑块和细胞内神经原纤维缠结。这个过程的许多机制细节仍然是未知的,但蛋白质聚集的一个确定结果是阿尔茨海默症脑中的突触功能障碍和神经元损失,包括线粒体功能障碍,氧化应激,炎症和金属代谢在内的不同途径都被认为与这一过程有关。金属离子如铜,锌和铁在健康和疾病状态的大脑中均发挥重要作用,并且金属离子在体内含量和分布的变化是不同神经退行性疾病和衰老的共同特征。阿尔茨海默症标志性蛋白和其中的金属结合性质可能是病理生理过程中重要的生物化学基础。本文建立了一种基于稳定同位素标记的对脑组织中Aβ蛋白进行绝对定量的方法。测量生物样品中低丰度的Aβ1-40是阿尔茨海默症研究中一个有意义的指标。以13C标记的Aβ1--40蛋白为内标,利用Aβ1-40蛋白三种抗体M3.2、4G8、11A50B的共同作用进行免疫沉淀,酸性(pH=2)70℃加热条件下洗脱,并与基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)联用,Aβ1-40蛋白标准品回收率可达到48.7%。利用该方法和ELISA试剂盒法分别测定小鼠脑组织匀浆上清中Aβ1-40的含量,两者没有显著性差异(p>0.1),该方法特异性好,并且操作简单,重复性、准确度好,更适用于市面上没有对应ELISA试剂盒的蛋白。本文还建立了 ID-ICP-MS方法,测定小鼠脑组织的皮层、海马、丘脑及其他脑区中的铁、铜、锌三种元素含量,并对检测限、定量限、精密度、重复性、准确度进行方法学验证。结果显示,相比于对照鼠,模型组鼠脑中铁、铜、锌在不同脑区中的含量有明显差异。铜、锌元素主要沉积在小鼠海马、皮层脑区,而铁元素主要沉积在小鼠海马区域。利用ELISA方法测定模型组与对照组小鼠不同脑区中的蛋白含量,以探究与阿尔兹海默症有关的蛋白和金属间的关系。结果表明,Aβ1-40蛋白、Aβ1-42蛋白、淀粉样前体蛋白(Amyloid precursor protein,APP)、tau蛋白均是海马、皮层中的含量较高,且模型组含量高于对照组,这与铁、铜、锌在各脑区中的分布很类似。而金属硫蛋白-3(Metallothionein-3,MT-3)在模型组小鼠各脑区中含量均低于对照组,且各脑区中含量差异不大。通过查阅文献,对所得的各蛋白和金属间的关系进行了机理方面的解释。本文新建立了两种方法分别定量小鼠脑组织中的蛋白和小鼠各脑区中的金属元素,并且探究了小鼠各脑区中蛋白与金属间的关系,为探索阿尔兹海默症中的金属与蛋白间的关系提供了参考,也为疾病标志物的定量研究开辟了新思路。