目的:研究PDLIM1在子痫前期胎盘滋养细胞中的表达模式,探讨PDLIM1的异常表达对滋养细胞功能的影响,阐明PDLIM1和ACTN4蛋白的关系,揭示PDLIM1对ACTN4蛋白翻译后修饰的作用及具体机制,以期为阐明子痫前期的发病机制提供新方向,并为子痫前期的预测和治疗提供潜在的靶点。方法:利用免疫沉淀联合液相色谱质谱法筛选出滋养细胞中ACTN4的结合蛋白PDLIM1,免疫共沉淀、GST-pulldown、免疫荧光检测滋养细胞中PDLIM1和ACTN4之间的蛋白结合,质粒共转染后免疫共沉淀检测PDLIM1与ACTN4互作的结构域。免疫荧光、免疫组化和Western blot方法检测PDLIM1在正常和PE胎盘组织组织中的定位和表达;采用sh RNA慢病毒感染或质粒转染法对滋养细胞中的PDLIM1和（或）ACTN4进行敲降或过表达,用Western blot、细胞划痕和Transwell对各组细胞的侵袭和迁移能力进行检测;采用Ed U、CCK-8、流式细胞凋亡检测各组细胞的增殖和凋亡水平;分别用Western blot和RT-q PCR检测PDLIM1和ACTN4在滋养细胞中蛋白和m RNA表达水平,及二者的相关性,并揭示滋养细胞中PDLIM1调控ACTN4蛋白稳定性的途径,进一步用免疫共沉淀阐明PDLIM1对ACTN4泛素化水平的影响。最后,利用免疫沉淀联合质谱分析筛选滋养细胞中ACTN4的优先泛素化位点。结果:免疫共沉淀、GST-pulldown、免疫荧光结果表明滋养细胞中PDLIM1和ACTN4存在直接结合,质粒共转染后免疫共沉淀结果显示PDLIM1的Middle结构域与ACTN4相互结合,ACTN4的RD结构域在与PDLIM1的相互结合中起到了重要作用。免疫荧光、免疫组化和Western blot结果显示,PDLIM1主要在胎盘的细胞滋养层细胞（CTB细胞）和间质绒毛外滋养细胞（i EVT细胞）表达,且在PE胎盘滋养细胞中,PDLIM1的表达较正常组明显升高。Western blot、细胞划痕和Transwell结果显示,PDLIM1的缺失使滋养细胞的侵袭迁移能力显著增强,当同时下调ACTN4表达时,细胞的侵袭迁移能力随之明显减弱。Ed U、CCK-8和流式细胞凋亡结果均显示在滋养细胞中敲降PDLIM1表达不影响细胞增殖与凋亡水平。Western blot和RT-q PCR结果显示PDLIM1改变ACTN4蛋白而非m RNA表达,敲降PDLIM1可以延长ACTN4蛋白的半衰期,降低ACTN4的泛素化水平,使ACTN4蛋白表达升高。进一步研究发现,ACTN4的K140、K166、K217、K622是其优先泛素化位点。结论:滋养细胞中PDLIM1与ACTN4存在直接结合。PDLIM1主要在胎盘的CTB细胞和i EVT细胞表达,且在PE胎盘滋养细胞中,PDLIM1的表达较正常组明显升高。PDLIM1/ACTN4轴参与调控滋养细胞的侵袭和迁移,而PDLIM1不参与调控滋养细胞的增殖。PDLIM1可以增加ACTN4蛋白的泛素化降解,降低ACTN4蛋白稳定性,其中ACTN4的K140、K166、K217、K622是其优先泛素化位点。