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研究背景在法医实践中,经常遇到蛛网膜下腔出血而导致死亡的案例,这类案件常发生在饮酒后的纠纷事件中,这就导致了在法医学实际鉴定中,外力、酒精含量及疾病对蛛网膜下腔出血的作用往往成为一个争论的焦点,其原因是我们不清楚其间的相互关系和确切的作用机制,因此提供不出一个科学的诊断标准。近年来,生物力学的研究方法和手段,为我们解决这方面的问题提供了一种新的思路和方法。目的本研究以不同的酒精浓度,对家兔灌酒,测定血中酒精浓度,建立血液乙醇浓度梯度动物模型,测定不同乙醇浓度动物模型局部脑微区的血流灌注量改变。在此基础上测定不同酒精浓度下家兔脑基底动脉的零压力状态,并用免疫组化的方法检测血管内皮细胞HSP70的表达,以探讨乙醇对脑基底动脉的影响,从而探索运用生物力学的方法为法医学实践中解决诸如醉酒在蛛网膜下腔出血中的作用等案件提供一定的理论基础。材料与方法1.动物分组及血液乙醇浓度梯度家兔动物模型的建立家兔40只,随机分成4组。用酒精灌胃造模,按0ml/Kg、5ml/Kg、10ml/Kg、15ml/Kg给家兔灌注56%市售食用白酒。2.家兔灌胃后不同时间血液酒精浓度的测定采用上海天美公司生产的D-7900气相色谱仪-美国DANNI86.85顶空自动进样器检测各组家兔灌胃后30 min、60 min、75 min、90min、105min、120min血液酒精浓度。3.家兔灌胃后不同时间测定脑血流量采用瑞典Perimed公司生产的PeriFlux5000激光多谱勒血流仪检测各组家兔灌胃前及灌胃后5 min、15 min、30 min、60 min脑微区血流量情况。4.基底动脉内皮细胞热休克蛋白(HSP)70的表达情况取灌胃2小时后家兔基底动脉,做组织切片,用免疫组织化学的方法染色,检测热休克蛋白(HSP)70的表达。5.家兔基底动脉零应力状态的测定各组家兔酒精灌胃2小时后,开颅取出家兔基底动脉,沿血管长轴连续横切,得到长度约为1mm的血管环,然后沿血管环径向剪开血管,静置于kreb’s液中20分钟,用数码相机采集得到血管零应力状态的数字化几何信息。用计算机图像分析软件AutoCAD Electrical 2006测量基底动脉张开角大小,以了解血管零应力状态的变化。结果1.灌酒后血液乙醇浓度持续增高,灌胃后1.5-2h,血液乙醇浓度达到峰值;灌酒后血液乙醇浓度与灌酒量存在正相关关系;2.家兔灌酒后局部脑微区血流量值明显增大,至30分钟后,各组家兔脑血流量基本恒定;灌酒后局部脑微区血流量值与灌酒量存在正相关关系;3.灌酒2小时后,家兔基底动脉切片,做免疫组织化学染色,发现热休克蛋白(HSP)70的表达,随灌酒量的增加而增加(P<0.05);4.各组家兔酒精灌胃2小时后基底动脉张开角均明显降低,各组之间差异存在统计学意义(P<0.05),且随灌胃量的增大基底动脉张开角降低越大。说明酒精浓度越大,基底动脉零应力状态越低。结论本研究通过实验证明:①灌酒后血液乙醇浓度与灌酒量存在正相关关系;②灌酒后局部脑微区血流量值与灌酒量存在正相关关系;③HSP70的表达随灌酒量的增加而增加;④酒精浓度越高,脑基底动脉零应力状态越低。