凋膜止崩方对子宫内膜增生症大鼠子宫组织中survivin和caspase-3表达的影响

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功能失调性子宫出血,其中85%为无排卵型功血,其主要的病理形态为子宫内膜增生,由于目前缺乏对子宫内膜增生症的分子机制的了解,严重阻碍了对该疾病的预防和治疗的发展。目的:通过检测凋膜止崩方靶向干预子宫内膜增生症大鼠子宫组织中survivin和caspase-3的表达,探讨其对survivin和caspase-3信号转导通路的影响,揭示其祛除增生子宫内膜的机制。方法:将健康成年SD雌性大鼠40只随机分为4组:设立空白对照组(A)、模型组(B)、大剂量组(C)、小剂量组(D),A组大鼠行开关腹手术,B组、C组、D组行去势手术,术后第三天起,肌肉注射苯甲酸雌二醇注射液60<mu> g/100g,隔日一次,共4周,建立大鼠子宫内膜增生症模型。A组大鼠术后第三天起肌注等量花生油,隔日一次,共4周。造模成功后,C组大鼠宫腔注入大剂量凋膜止崩方0.3ml/侧,D组大鼠宫注入小剂量凋膜止崩方0.3ml/侧,B组大鼠宫腔注入生理盐水0.3ml/侧,三天后处死。留子宫组织,部分置于10%甲醛溶液中固定,其余组织经液氮冷冻后置于超低温冰箱储存。分别采用实时定量聚合酶链反应(Real time PCR)和免疫组织化学方法检测survivin、caspase-3在正常子宫内膜、子宫内膜增生症组织、大小剂量试验组的表达,并比较它们之间的表达差异。结果:1.镜下见:A组:腺上皮细胞单层柱状,腺体稀少;B组:腺上皮细胞增生,腺体增多,腺腔增大;C组:肌层及浆膜层有炎细胞浸润,上皮全部坏死脱落;D组:粘膜上皮大部分坏死脱落,大鼠子宫内膜局部炎症明显,内膜部分缺如,腺体稀少。2. Survivin和caspase-3在正常子宫内膜,增生子宫内膜和大小剂量用药组子宫组织中均有表达。Survivin在子宫内膜增生症组织中的表达水平明显高于正常子宫内膜组织,caspase-3在子宫内膜增生症组织中的表达水平明显低于正常子宫内膜组织;凋膜止崩方作用后survivin表达降低,而caspase-3表达升高。且A组与B组(P<0.05),B组与C、D组之间差异有统计学意义(P<0.05),在A组和B组中,survivin和caspase-3呈显著负相关。结论:1.去势大鼠雌激素负荷法能使子宫内膜增生症模型成功建立。2.模型大鼠子宫内膜组织中survivin表达明显升高,caspase-3表达明显降低。3.大、小剂量的凋膜止崩方对大鼠子宫内膜均有明显的祛除作用;大小剂量组间比较,无统计学意义。4.凋膜止崩方通过降低大鼠增生子宫内膜中survivin表达,增高caspase-3表达,从而加速了子宫内膜中细胞凋亡过程,达到祛除大鼠增生过长子宫内膜的目的。5.凋膜止崩方对大鼠子宫内膜的靶向作用显著,有望成为治疗功能性子宫出血的新药。
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