慢性乙肝患者外周血T淋巴细胞亚群分析及Caspase-3活性的相关研究

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目的:慢性乙肝是一种严重危害人类健康的传染性疾病,目前尚无理想的治疗方案,研究HBV感染后机体的免疫状态有助于临床治疗及对预后的评价。慢性乙肝的发病机制与外周血淋巴细胞免疫密切相关,特别是T淋巴细胞的参与。T细胞的数量与状态决定机体的免疫功能,与乙肝病毒清除与否直接相关。对慢性乙肝、肝硬化患者进行T细胞亚群分析,并与HBV复制水平进行相关性分析,提示病情不同阶段T细胞数量有显著差异。另外HBV是一种泛嗜病毒,可诱导T细胞凋亡,影响病情转归。对细胞凋亡因子Caspase-3在T细胞中的表达进行研究,探讨T细胞凋亡与慢性乙肝病情进展的相关性。 方法:随机选取慢性乙肝、乙肝肝硬化病人38人,抽外周静脉防凝血4ml,2ml用于流式细胞仪测定CD3+、CD4+、CD8+T数量,2ml经过诱导孵育后进行Caspase-3标记,通过流式细胞仪测定T淋巴细胞中Caspase-3活性,结合外周血HBV-DNA定量,用SPSS10.0软件进行统计学分析。 结果:慢性乙肝与肝硬化患者外周血T淋巴细胞亚群数量有显著差异,CD3+、CD4+、CD8+T呈下降趋势;肝硬化患者CD3+、CD8+T明显低于慢性乙肝患者,而CD4+/CD8+无明显差异。进一步分析发现,CD3+T数量与HBV-DNA定量相关。HBV-DNA定量<10~5Copies/ml与HBV-DNA≥10~5Copies/ml的病人中,CD3+T、CD8+T呈下降趋势且有显著差异,提示随着HBV-DNA定量的升高,T淋巴细胞数量减少,高病毒复制导致T淋巴细胞凋亡增加。Caspase-3是细胞凋亡的重要因子,进一步测定T细胞中Caspase-3活性,活化诱导后慢性乙肝患者组较正常对照有显著差异,而且与HBV-DNA定量相关,HBV-DNA≥10~5copies/ml,Caspase-3阳性的T淋巴细胞数值明显升高;在慢性肝炎及肝硬化分组中Caspase-3阳性率无显著差异。 结论:1、慢性乙肝病情进展与T细胞数量和功能状态有关; 2、T细胞数量与HBV-DNA定量相关,随着HBV-DNA定量的升高,T淋巴细胞数量减少。 3、T细胞中存在HBV诱导的细胞凋亡; 4、Caspase-3是表示细胞凋亡的重要因子,HBV复制活跃,外周血T淋巴
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