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目的:利用食品级可生物降解的高分子材料制备去氢骆驼蓬碱(Harmine hydrochloride,HM)载药纳米微球(HM Nanoparticles,HM-NPs),检测HM-NPs的各项表征,研究HM-NPs的体外抗胃癌细胞的活性,探讨载药纳米微球不同于裸药的抗肿瘤的机制。方法:本研究利用开环聚合法制备聚乙二醇的嵌段共聚物(polycaprolactone Polyethylene glycol,PCL-PEG),用溶剂分散法制备HM-NPs。通过扫描电镜及透射电镜观察纳米微球的形态,用动态光散射仪测定载药纳米微球的粒径。用高效液相色谱法测定、计算出HM-NPs的载药量和包封率,并测定该微球的体外释放曲线。采用MTT法测定去氢骆驼蓬碱裸药和载药纳米微球对人胃癌细胞株SGC-7901系的杀伤效果。用荧光显微镜观察人胃癌细胞摄入负载荧光素的纳米微球的效果。采用荧光倒置显微镜来检测裸药和载药纳米微球和抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)对于肿瘤细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平表达的影响。将胃癌细胞分为空白对照组、空NPs组,HM组、HM-NPs组,HM+NAC组和HM-NPs+NAC组等,分别予以相应药物,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,Western blot法检测各组胃癌细胞p-AKT,AKT,Bcl-2,Bax和Caspase-3等蛋白质水平的表达情况。结果:HM微球规则圆形,表面光滑,大小均一,直径为100 nm左右。该微球的载药量为4.97±0.26%,包封率为82±4.8%。HM-NPs在体外可缓释,在最初有一个突释效应,大约有30%的去氢骆驼蓬碱在最初的5小时内被释放,约60%左右的去氢骆驼蓬碱在随后的5天内被缓慢释放。在SGC-7901细胞上,HM微球与HM裸药所显示的杀伤效果都具有浓度和时间依赖性。随着浓度的增加,作用时间的延长,HM纳米微球的抗肿瘤效果显著强于HM裸药。细胞摄取实验显示,负载香豆素的纳米微球与胃癌细胞共孵育2小时后,可有效的进入细胞内。将胃癌细胞分为空白对照组、空NPs组,HM组、HM-NPs组,HM+NAC组和HM-NPs+NAC组等,分别予以相应药物作用后,通过荧光倒置显微镜观察细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生,发现摄入HM-NPs胃癌细胞内的ROS水平升高程度更为明显。各组间ROS水平由高到低依次为:HM-NPs组>HM组>HM-NPs+NAC组>HM+NAC组。通过流式细胞术检测各组肿瘤细胞的凋亡率,发现摄入HM-NPs细胞的凋亡率明显高于摄入裸药或抗氧化剂的细胞。各组凋亡率依次为:HM-NPs组>HM组>HM-NPs+NAC>HM+NAC组。对HM纳米微球差异于裸药的抗肿瘤活性,我们用Western Blot法进一步检测凋亡相关细胞的信号分子的活性,结果显示HM-NPs处理组的p-AKT表达水平最低,各组间p-AKT的表达水平依次为:HM-NPs组<HMH组<HM-NPs+NAC<HM+NAC组。而AKT表达水平在各组间未见明显差异。HM-NPs组的Bcl-2表达水平最低,各组间Bcl-2的表达水平依次为:HM-NPs组<HMH组<HM-NPs+NAC<HM+NAC组。HM-NPs组的Bax表达水平最高,各组间Bax的表达水平依次为:HM-NPs组>HMH组>HM-NPs+NAC>HM+NAC组。HM-NPs的Caspase-3表达水平明显高于裸药或抗氧化剂处理组,各组间Caspase-3的表达水平依次为:HM-NPs组>HMH组>HM-NPs+NAC>HM+NAC组。结论:本研究首次报道一种去氢骆驼蓬碱的载药纳米微球的制备新方法,在对该微球的性质进行表征的基础上,证明该载药纳米微球具有良好的缓释特性。进一步的研究结果提示,HM-NPs的体外抗肿瘤的活性明显优于裸药,主要机制为诱导肿瘤细胞内ROS水平增加,并藉此抑制PI3K/AKT信号通路促进细胞凋亡。本研究结果为治疗胃癌提供了一种新的有效给药途径。