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目的:建立灵芝的特异性PCR鉴别方法;分别建立测定灵芝药材中麦角甾醇、尿苷和腺苷、灵芝酸A的高效液相色谱方法,为完善灵芝药材质量控制提供参考方法,同时比较不同产地灵芝中三类化合物的含量差异。方法:第一,收集12批灵芝药材,依据《中国药典》规定,对这些药材的性状、水分、总灰分、浸出物、显微鉴别等项目进行检查。第二,建立特异性PCR鉴别方法。第三,建立高效液相色谱含量测定方法。1.灵芝药材中麦角甾醇的含量测定方法。色谱条件:色谱柱为Welch Ultimate LP-C18柱（4.6×150mm,5μm）,流动相100%甲醇,流速1ml/min,柱温26℃,DAD检测,波长283nm,进样量5μl;同时对方法学进行考察。2.灵芝药材中尿苷和腺苷的含量测定方法。色谱条件:色谱柱为Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱（4.6×150mm,5μm）;流动相甲醇（A）-0.01mol/L磷酸二氢钾溶液（B）梯度洗脱,比例A%:5%（0min）→5%（10min）→13%（15min）→13%（25min）,流速0.8mL/min,柱温26℃,DAD检测,波长260nm,进样量对照品3μl,供试品10μl;同时对方法学进行考察。3.灵芝药材中灵芝酸A的含量测定方法。色谱条件:色谱柱为Welch XtimateTM-C18柱（4.6mm×250mm,5μm）,流动相乙腈-0.01%醋酸（体积比37:63）,流速为1mL/min,柱温30℃,进样量10μL,蒸发光散射器漂移管温度为105℃,空气流速2.8L/min;同时对方法学进行考察。结果:灵芝药材的性状、水分、总灰分、浸出物、显微鉴别等都符合《中国药典》的规定;建立的特异性PCR鉴别方法,凝胶成像结果条带单一清晰;麦角甾醇的回归方程为Y=1531.1X+3.358（r=1）,进样量在0.08321.664μg范围内与峰面积具有良好的线性关系,其平均加样回收率为98.68%（RSD=1.9%）;尿苷、腺苷的回归方程分别为Y=7.5404X-10.409（r=0.9998）,Y=27.845X-9.2962（r=0.9999）,浓度分别在2.82590.4μg/mL、0.98598.5μg/mL范围内与峰面积具有良好的线性关系,尿苷、腺苷平均加样回收率为97.22%（RSD=0.56%）,97.71%（RSD=0.60%）;灵芝酸A的回归方程为Y=1.765X+5.5352（r=0.9998）,进样量在0.89285.3568μg范围内,峰面积的对数值与进样量的对数值具有良好的线性关系;其平均加样回收率为95.81%（RSD=0.8%）。结论:本研究建立的特异性PCR鉴别方法能够快速、简单地进行操作,结果准确;而三种HPLC含量测定方法,操作简便、结果准确、重现性好,可为灵芝的质量控制提供参考方法;同时测定的不同产地的灵芝药材,三类化合物的含量差别较大,质量参差不齐,购买和使用是一定要注意其质量问题。