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随着我国工农业的迅猛发展和城市化进程的加快,生活污水、工业废水、农业灌溉废水中污染物的排放量日益增加,加上人们环保意识薄弱,湖泊富营养化问题日渐突出,各水系频发水华现象。藻类的大量繁殖威胁着水系统的质量与安全,因此水华的有效控制和治理具有重要的现实意义。对水华进行生物控制的微生物主要有细菌、放线菌、原生菌、真菌、噬藻体,其中噬藻体是一种能够高效分解蓝藻的病毒,对蓝藻水华的治理有重要的潜在意义,近年来受到大家越来越多的关注。本实验室从太湖筛选到一株能够感染铜绿微囊藻905的噬藻体,根据其理化性质的研究,进一步探讨了该噬藻体的感染对宿主细胞周期蛋白表达和细胞周期的影响。(1)通过FeCl3化学絮凝法、超滤法、PEG6000浓缩法浓缩噬藻体,结果表明,FeC13化学絮凝浓缩法浓缩噬藻体回收率为67.65%,超滤法浓缩噬藻体回收率为71.84%,PEG6000农缩法浓缩噬藻体的回收率为48.32%。(2)采用冻融法、超声波法、研磨法对不同密度破碎铜绿微囊藻905细胞进行破碎,结果表明冻融法破碎效率受细胞密度影响不大,超声波法、研磨法随着细胞密度的增加破碎效率略有增加。冻融四次、超声波破碎细胞8min以后藻细胞破碎效率均可达到90%以上,研磨法研磨8min后细胞破碎率在80%左右。(3)用显微镜对藻细胞计数、双层平板法对噬藻体计数结果显示,对照组中由于噬藻体失活失去感染效力,藻细胞数量持续增长,Oh时藻细胞个数为2.4x106个/mL,48h后达到5.5×106个/mL。试验组中加入噬藻体后,噬藻体数量持续增长,从0h的6×105个/mL增加到48h的1.92×106个/mL;噬藻体加入初期,刺激藻细胞增殖,藻细胞的数量经历了缓慢增长,18h后呈显著下降趋势,从0h的2.25×106个/mL减少到48h的4.8×105个/mL。(4)采用超滤法浓缩噬藻体,感染铜绿微囊藻905,冻融法破碎感染后的藻细胞,提取蛋白质。蛋白质印迹结果表明,噬藻体加入初期刺激了藻细胞的增殖,噬藻体可能通过抑制宿主周期蛋白p34Cdc2的形成,抑制p34Cdc2/CyclinB复合物的活性,在G2/M检查点阻断铜绿微囊藻905细胞的生命周期。