论文部分内容阅读
智能两亲性嵌段共聚物纳米胶束可增加疏水性药物的溶解性,并具有肿瘤被动靶向特性,广泛应用于疏水性抗肿瘤药物的递送。药物共递送可实现肿瘤化疗的增效减毒;而且,药物分子的应答释放可使其快速起效。本课题旨在构建两种pH敏感聚合物胶束以实现姜黄素(Cur)与阿霉素(Dox)的共传递,并在肿瘤细胞内酸性微环境下触发药物的释放,实现对癌细胞的快速杀伤作用。选择两亲性聚合物聚乙二醇-聚乳酸(mPEG-PLA),分别利用乙酰丙酸、戊二酸酐修饰姜黄素分子,得到两种姜黄素单端修饰产物。将这两种衍生物分别与mPEG-PLA反应,制备两种pH敏感型高分子-姜黄素轭合物:mPEG-PLA-hydrazone-Cur(腙键为pH敏感化学键)和mPEG-PLA-Cur(酯键为pH敏感化学键)。采用透析法,在轭合物胶束内部物理包载阿霉素,构建两种载药纳米胶束即mPEG-PLA-hydrazone-Cur/Dox和mPEG-PLA-Cur/Dox。通过1H-NMR对聚合物的化学结构进行表征,证实了两种聚合物轭合物的成功合成,并根据特征峰的积分面积计算得出mPEG-PLA-hydrazone-Cur和mPEG-PLA-Cur中姜黄素接枝率分别为88%和39%。利用芘探针荧光光谱法测定mPEG-PLA-hydrazone-Cur的临界胶束浓度(CMC)为7.7±0.1μg/m L,证明胶束具有良好的物理稳定性。采用激光粒度分析仪(DLS)测定聚合物胶束物理载药前后的粒径大小约为90 nm,具有被动靶向性。通过透射电镜(TEM)观察到所得纳米胶束均呈大小均一且分布均匀的球形结构。利用高效液相梯度洗脱方法实现姜黄素和阿霉素的同步定量检测。体外释药实验结果表明:不同胶束中两种药物释放行为均呈现pH依赖性,pH值越低,释放越快。本文选用人肝癌细胞HepG2对两种载药胶束的细胞毒性和细胞摄取能力进行考察。结果表明以腙键相连接的载药纳米胶束mPEG-PLA-hydrazone-Cur/Dox具有较强的细胞毒性。细胞摄取实验证明了纳米胶束可实现阿霉素与姜黄素的共递送。综上所述,应用pH敏感型聚合物纳米胶束可实现姜黄素与阿霉素的共递送,有望成为难溶性抗癌药物共递送的高效载体,从而实现多抗癌药物对肿瘤细胞的协同杀伤作用,在降低毒副作用、提高疗效方面具有广阔的应用前景。