【摘 要】
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鸭坦布苏病毒病（Duck Tembusu virus,DTMUV）是由坦布苏病毒（Tembusu virus,TMUV）引起的一种禽的急性传染病,对养鸭业带来了数以亿计的经济损失。禽类是该病的主要宿主,同时也有报道在人的血清中检测到坦布苏病毒抗体和核酸。但至今人类是否能感染坦布苏病毒尚未定论。动物模型是研究动物感染疾病的致病机制和传播途径的基础,建立一个成功的动物模型对研究疾病的发生机制具有重要作
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鸭坦布苏病毒病（Duck Tembusu virus,DTMUV）是由坦布苏病毒（Tembusu virus,TMUV）引起的一种禽的急性传染病,对养鸭业带来了数以亿计的经济损失。禽类是该病的主要宿主,同时也有报道在人的血清中检测到坦布苏病毒抗体和核酸。但至今人类是否能感染坦布苏病毒尚未定论。动物模型是研究动物感染疾病的致病机制和传播途径的基础,建立一个成功的动物模型对研究疾病的发生机制具有重要作用。本实验以一株从临床分离鉴定的坦布苏病毒（BZ株）分别建立了感染樱桃谷鸭雏鸭和BALB/c小鼠的动物疾病模型,为以后研究坦布苏病毒的感染及跨物种传播机制提供参考。本研究以10日龄樱桃谷雏鸭和21日龄BALB/c小鼠为实验动物,分别设阴性对照组和攻毒组。攻毒组每只腿肌注射0.2 mL(TCID50=10-7.39/0.1mL)坦布苏细胞病毒液,阴性对照组注射等体积的无菌生理盐水。均饲养在合格环境内,自由采食和足量饮水。染毒后不同时间观察动物的临床症状、病理变化;检测排毒规律、细胞因子含量以及不同脏器的载毒量变化。结果如下:1、临床症状及剖检变化:雏鸭表现出头颈震颤、劈叉姿势和痉挛等典型神经症状,偶见死亡。剖检发现肝脏坏死、出血和土黄色变化;大脑毛细血管树枝状充血、水肿;肾脏和脾脏肿大、坏死;胰腺坏死、液化;肺脏出血、水肿;心脏有条纹状出血。而BALB/c小鼠未出现典型临床症状,但采食量下降、体重生长缓慢,且攻毒后出现死亡。表明感染坦布苏病毒的樱桃谷雏鸭和BALB/c小鼠均出现不同程度的临床症状。2、组织病理学观察:雏鸭出现脑血管充血、病毒性脑炎;心脏、肝脏、脾脏和肾脏均出现异嗜性粒细胞和淋巴细胞浸润;心肌纤维、肾小管上皮细胞和肝细胞变性等病变。而BALB/c小鼠则表现为大脑皮层及海马区出现大量神经元细胞紧缩深染;心脏心肌间质出血;肝脏肝细胞和肾脏皮髓质交界处肾小管上皮细胞水肿变性;肺脏肺泡壁增厚等病理改变。结果表明,坦布苏病毒可导致樱桃谷雏鸭和BALB/c小鼠脏器组织出现明显病变。3、排毒及载毒量检测:雏鸭和小鼠排毒规律表现基本一致,利用RT-PCR方法检测鸭的泄殖腔棉拭子和小鼠的粪便,结果显示动物感染第2天开始排毒,并一直持续到结束。通过qRT-PCR技术检测各组织内的载毒量,结果表明雏鸭和小鼠各组织均能检出病毒。雏鸭大脑内载毒量最高,其次是脾脏、心脏、法氏囊、胰腺;而小鼠的肝脏、肺脏中病毒含量较高,大脑内则相对较低。结果显示,雏鸭和小鼠均能感染坦布苏病毒并进行复制,且禽类的主要病毒侵袭部位是脑,而哺乳动物是肝脏。4、细胞因子含量检测:雏鸭和小鼠细胞因子（IL-2、IL-4、INF-γ）总体趋势一致,不同时间点攻毒组明显高于对照组（P<0.05）,且细胞因子浓度且与攻毒时间成正相关。结果表明,雏鸭和小鼠均能感染坦布苏病毒并出现免疫应答反应。通过以上试验成功建立了鸭坦布苏病毒感染樱桃谷雏鸭的疾病动物模型以及初步建立了鸭坦布苏病毒感染BALB/c小鼠的疾病动物模型。
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