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研究背景:淋巴瘤是一组起源于淋巴结或结外淋巴组织的恶性肿瘤,可分为霍奇金淋巴瘤(HLs)及非霍奇金淋巴瘤(NHLs).随着诊断及治疗手段的发展,淋巴瘤等血液系统恶性肿瘤的预后得到了一定改善,但仍有部分患者在治疗中出现进展或因复发而死亡。近年来,研究发现肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophage,TAM)在肿瘤的发生、进展及转移过程中起重要作用。TAM广泛浸润与典型霍奇金淋巴瘤、滤泡淋巴瘤、粘膜相关淋巴组织淋巴瘤、血管免疫母细胞T细胞淋巴瘤等多种淋巴瘤的不良预后相关。因此探讨淋巴瘤等血液系统恶性肿瘤患者的外周血单核细胞与TAM的转化效应及TAM对肿瘤细胞的作用,可为淋巴瘤等血液系统恶性肿瘤患者风险分层提供依据,并为新型治疗手段的研发提供方向及靶点。研究目的:1、探讨淋巴瘤及骨髓瘤患者的TAM体外转化过程。患者与健康人之间有无差异;患者TAM转化效应与疾病临床特征是否相关。2、探讨体外条件下,患者TAM对PTCL(peripheral T-cell lymphoma)肿瘤细胞生长的作用。研究方法:1、单核细胞系THP-1与PTCL肿瘤细胞株(HUT-78)共培养,经流式细胞分析测定单核细胞表型变化,同时计数肿瘤细胞,观察肿瘤生长情况,经SPSS.20软件对数据进行分析,为建立外周血单核细胞TAM转化模型摸索条件。2、使用Ficoll-Hypaque密度梯度离心法提取初治淋巴瘤、骨髓瘤患者及健康人外周血单个核细胞,经CD14免疫磁珠分选获得纯化单核细胞,与HUT-78共培养,经流式细胞分析测定单核细胞表型变化,同时计数HUT-78肿瘤细胞,观察肿瘤生长情况,最后经SPSS.20软件对数据进行分析。研究结果:1、THP-1及HUT-78以1×105cells/ml密度共培养72小时后,THP-1单核细胞样本中CD68(+)、CD163(+)、CD68&CD163(+)细胞所占比例明显增高(p值分别为0.00004、0.005181、0.001804):上述细胞平均荧光强度无明显变化。2、THP-1及HUT-78以1×105cells/ml密度培养时,不同时间点,相对各单独培养组细胞计数之和,THP-1与HUT-78共培养组细胞计数明显增多(p=0.010989)。3、患者单核细胞样本中,CD68(+)、CD163(+)、CD68&CD163(+)细胞比例在共培养后显著增加(p值分别为0.000078、0.018981、0.012987);CD163(+)细胞、CD163&CD68(+)细胞中CD163成分的平均荧光强度,于共培养后亦显著增加(p值分为0.049950、0.017414)。健康人单核细胞样本中,上述细胞比例及平均荧光强度在共培养前后无明显变化。相对健康对照组而言,患者组单核细胞与肿瘤细胞共培养后,单核细胞样本中CD68(+)、CD68&CD163(+)细胞比例增加更明显(p值分别为0.017982、0.045954);患者组及健康对照组单核细胞在平均荧光强度表达上无统计学差异。4、患者组中,于不同时间点观察到共培养组HUT-78计数多于各单独培养组之和,其中三名患者的计数差值存在统计学意义(p值分别为0.046581、0.041563、0.007960)。健康对照组中未观察到上述现象。患者组与健康对照组之间的差异不具有统计学意义。5、患者单核细胞与肿瘤细胞共培养后,单核细胞样本中CD68&CD163(+)细胞比例增多与骨髓浸润相关。研究结论:1、THP-1与PTCL细胞共培养后可转化为TAM,TAM可促进PTCL细胞生长。2、体外条件下,人外周血单核细胞与PTCL细胞共培养后可转化为TAM,TAM对PTCL细胞生长起一定促进作用。3、发现淋巴瘤或骨髓瘤患者单核细胞TAM转化能力强于健康人的现象。4、与PTCL细胞共培养后,患者单核细胞样本中CD163&CD68(+)细胞比例增多与骨髓浸润相关。