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细菌素是一种能被很多生物代谢的热稳定的抗菌肽,乳酸菌能够代谢出具有杀死或抑制其他细菌的细菌素,在食品工业中具有巨大的生物技术潜力。为了满足消费者的需求,减少在加工过程中添加化学防腐剂,乳酸菌细菌素作为天然食品防腐剂备受关注。因此具有广谱的抗菌活性的细菌素是值得考虑的天然防腐剂。 在这项研究中,从中国传统发酵食品中分离出16株菌株,对其进行了抗菌活性测定。对活性最高的菌株进一步进行16S rRNA鉴定。NCBI结果显示与干酪乳杆菌100%相似(kp966438.1)。培养干酪乳杆菌的培养基选择的是排除其他成分干扰的番茄培养基。干酪乳杆菌纯化(Sephadax G-25>HiPrep QXL16/10 column of AKTA> RPC column of AKTA> reverse phase HPLC)的细菌素被命名为LiN333。其抗菌活性在温度(60,80,100,121℃)和pH(pH3,4,5,6,7,8,9)有较好抗菌活性。酶处理证明α-胰蛋白酶显著降低其抑菌活性。干酪乳杆菌在37。C培养24 h,显示出革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌有好的抗菌活性。MALDI-TOF-MS结果显示Iin333分子量为4890da。使用扫描电子显微镜分析LiN333作用机制,其最低抑菌浓度为15μg/ml。LiN333有很好的热稳定,pH稳定性,所以其有潜力的食品添加剂。 虽然对细菌素基因,生化特征,以及其作用机理有许多研究,但仍有许多方面是未知的。因此,当前工作的目的是对新型细菌素表征研究。当前工作的结果表明,干酪乳杆菌在革兰氏阳性和革兰氏阴性菌有良好的抗菌活性在食品工业中的具有潜在的应用价值。因此,进一步的工作主要在,LiN333的完整序列,在体内研究抗菌,抗真菌,抗病毒活性,化学食品防腐剂替代方面。