【摘 要】
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为了寻找和研究心血管系统有关的重要功能基因及其表达模式,通过构建正常成人心脏和主动脉cDNA文库,并在大规模ESTs测定的基础上,筛选出一个新基因Nelin.该实验主要研究蛋白
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为了寻找和研究心血管系统有关的重要功能基因及其表达模式,通过构建正常成人心脏和主动脉cDNA文库,并在大规模ESTs测定的基础上,筛选出一个新基因Nelin.该实验主要研究蛋白质Nelin的生物特性,以深入探讨新基因Nelin的生物功能,为阐明该基因在心血管系统中的作用以及同心血管系统疾病间的关系提供依据.实验方法为首先对Nelin基因的核酸序列及其表达产物的氨基酸序列进行了生物信息学分析.然后对生物信息学分析提示出的一些蛋白质生物学特性进行进一步的实验验证,包括F-Actin结合共沉淀实验和细胞荧光免疫组化实验.同时应用酵母双杂交系统筛选人心脏cDNA文库,以期发现能与Nelin相互作用的蛋白质.最后进行了免疫共沉淀实验以验证酵母双杂交筛选结果Filamin同Nelin间结合的可靠性.该研究的意义在于对心肌特异表达的新基因Nelin的生物特性有了一个初步的了解,为以后的进一步生理、病理研究打下了基础.并为随后的功能实验提供了观测和研究的指标.研究Nelin在心肌收缩、心肌细胞信号传导中的作用对阐明心肌肥厚、心衰等心脏疾病的机制,发现疾病治疗的新靶点同样具有重要意义.
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