熄风通络法与益气活血法对脑缺血神经元凋亡及凋亡调控基因影响的对比研究

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熄风通络法与益气活血是常用治疗急性脑梗死的方法,本课题从分子水平比较了这两种治疗方法对沙土鼠持续性脑缺血后神经元凋亡的影响,以及从基因水平比较了对持续性脑缺血老龄高脂血症大鼠凋亡调控基因bcl-2、bax表达水平的影响,从而考察这两种治法在治疗急性脑梗死方面的意文。 参照1994年国家中医药管理局发表的《中风证候辨证诊断量表》,通过对427例急性脑梗死住院病人进行风证与气虚证的分布调查。结果发现风证单独出现者24例,占5.62%,风证单独及与其它证合并出现者308例,占72.13%;无气虚证单独出现者,气虑证与其它证合并出现者(主要是气虚血瘀)39例,占9.14%。同时通过对风证和气虚证与血压、梗死部位、梗死面积、肌张力、合并疾病关系的分析,发现风证组的肌张力增高者居多,梗死面积普通以大、中面积为主,梗死部位广泛见于各种部位,以基底节区为主;而气虚证组肌张力降低者居多,梗死面积普通以中、小面积为主,梗死部位以脑叶为主。 实验研究方法:结扎沙土鼠单侧颈总动脉,造成脑缺血、采用TUNEL法,分别检测沙土鼠缺血后6小时及48小时凋亡神经细胞数;选取老龄Wistar大鼠,给予高脂饲料形成高脂血症的基础上,结扎大鼠双侧颈总动脉,造成大鼠全脑缺血,取脑,检测脑组织神经细胞凋亡情况,并采用RT-PCR法检测脑组织海马区凋亡调控基因bax、bcl-2表达水平。结果:缺血6小时模型组沙土鼠可见部分阳性凋亡细胞,而熄风通络组阳性凋亡细胞明显少于模型组,亦少于益气活血组;缺血48小时,模型组沙土鼠大部分可见多量阳性凋亡细胞,而熄风通络组只有部分沙土鼠可见少量阳性凋亡细胞,益气活血组则有部分可见多量阳性凋亡细胞。其中熄风通络组凋亡细胞计数明显少于模型组(P<0.05)。模型组在大鼠脑缺血后24小时可出现多量阳性凋亡细胞,熄风通络组阳性凋亡细胞明显减少,且少于益气活血组;模型组bax表达水平较正常组及假手术组明显增高,bcl-2表达水平较正常组及假手术组明显降低;熄风通络组bax表达水平较模型组明显降低,且低于益气活血组;bcl-2表达水平较模型组明显增高,且高于益气活血组,差异均有显著性意义(P<0.01)。 结论:熄风通络法有抗脑缺血引起的神经细胞凋亡,增高抗凋亡基因bcl-2的表达水平,抑制促凋亡基因bax的表达水平的作用,这一作用优于益气活血法。
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