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背景: Oddi括约肌（sphincter of oddi，SO）是胆胰肠结合部最重要的解剖结构，是胆汁排出胆道的唯一门户，被喻为胰液和胆汁流动的“闸门”。SO由胆总管末端括约肌、胰管末端括约肌、乳头括约肌三部分环行平滑肌纤维及纵肌束共四部分组成，S0不属于肠肌组织，在人胚胎第4周，胆、胰管汇入十二指肠前相互以胚胎间充织连接形成原始壶腹，第6周肠肌形成，第10周间充组织转化成肌组织。研究发现，SO具有前向收缩的特性，其收缩与十二指肠同步但又互不相干，SO通过该特性调节胆胰液分泌和维持胆胰液正常流向，保持胆道无菌环境，因此SO生理功能与胆道动力学有密切关系。SOD（sphincter of Oddi dysfunction，SOD）是临床常见病，根据其病理机制，SOD分为SO狭窄和SO功能紊乱两种情况，SO功能紊乱的实质为SO的持续性痉挛。魏经国教授已经证实高胆固醇血症可使SO动力发生改变，高胆固醇血症能够诱发兔SO功能紊乱[1-3]。早在1887年，意大利生理学家Oddi发现了SO，并指出部分患者不明原因的腹痛、发热或黄疸可能是由于SO病变引起[4]。经过国内外20余年的研究，发现Oddi括约肌功能障碍（spincterof Oddi dysfunction，SOD）是大多数胆系疾病发病机制的主导环节和关键的继发病理生理改变。国内外对血管平滑肌及胃肠道平滑肌运动机制的研究较多，而对于SO运动机制的研究较少，已有文献报道芍药甙可以通过多种途径舒张胃肠道平滑肌[4]，最近已有研究证实芍药有效成分芍药甙对家兔离体SO肌环同样具有舒张作用[5]，芍药甙舒张胃肠道平滑肌机制为降低细胞内钙离子浓度，而芍药甘草汤舒张SO机制是否与舒张胃肠道平滑肌机制相同，目前未见相关报道。为进一步研究芍药甙作用机制，本实验采用芍药甘草汤含药血清负载兔SO细胞，采用激光共聚焦显微镜技术测定细胞内钙离子浓度，从而在细胞水平上阐明芍药甘草汤对高胆固醇血症兔SO细胞的作用机制，从而在一定程度上为临床芍药甘草汤治疗SOD提供理论依据。目的：1.探讨高胆固醇对兔SO细胞内钙离子浓度的影响；2.探讨芍药甘草汤含药血清对高胆固醇血症兔SO细胞内钙离子浓度的影响。方法：1.纯种新西兰兔16只随机分为两组，对照组（control，eoN）和高胆固醇血症（hypereholesterolemia，HC）模型组各8只，对照组饲以标准饲料，实验组饲以标准饲料+胆固醇，共饲八周，诱发高胆固醇血症兔2.纯种新西兰兔24只，随即分为8组，每组3只，芍药甘草汤灌胃，2次/天，共三天，末次给药后分别于5分、15分、30分、45分、60分、90分、120分、180分8个时间点经股动脉采血，用高效液相色谱仪测定血清中芍药甙和甘草酸的浓度，绘制血药浓度曲线，取最高血药浓度时间为含药血清标本采血时间。3.纯种新西兰兔8只,随机分为2组，每组4只，对照组，蒸馏水灌胃，2次/天；实验组，芍药甘草汤灌胃，2次/天，共三天，两组末次灌胃后75min股动脉采血，分离血清，稀释成高、中、低浓度，经56℃恒温水浴30min灭活补体，0.22μm滤膜过滤除菌，放于-20℃冻存备用。4.取高胆固醇血症兔SO段，酶消化法获取SO细胞，行原代培养，免疫组织化学法鉴定，Fluo-3/AM负载SO细胞，使用共聚焦显微镜技术测定细胞内钙离子浓度。结果：1.高胆固醇血症组SO细胞内钙离子浓度较正常组高；2.芍药甘草汤含药血清组高胆固醇血症兔SO细胞内钙离子浓度较对照组低，并随含药血清浓度的增加，细胞内钙离子浓度降低幅度增加。结论：1.SO细胞是贴壁细胞，细胞呈长梭形；2.高胆固醇能引起兔SO细胞内钙离子浓度升高；3.芍药甘草汤含药血清能降低高胆固醇血症兔SO细胞内钙离子的浓度，并呈浓度依赖性；4.SO通过改变胞内钙离子浓度的变化引起括约肌的舒缩。