【摘 要】
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为了研究小鼠着床丝氨酸蛋白酶2(Implantation Serine Proteinase 2,ISP2)的功能及其在胚泡着床中的作用机理,需要制备ISP2特异性抗体和分离纯化具有生物活性的重组ISP2(rISP
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为了研究小鼠着床丝氨酸蛋白酶2(Implantation Serine Proteinase 2,ISP2)的功能及其在胚泡着床中的作用机理,需要制备ISP2特异性抗体和分离纯化具有生物活性的重组ISP2(rISP2).为此,采用基因重组技术制备ISP2蛋白.首先,该研究构建了pGEX-4T-2/ISP2表达质粒,在大肠杆菌DE3中表达了GST-ISP2融合蛋白.用SDS-PAGE分离纯化得到GST-ISP2,牛凝血酶酶切后,仍用同样的方法分离纯化得到rISP2.用rISP2作为免疫原免疫家兔获得ISP2多克隆抗血清.Western blot和免疫组化证明该抗体有明显的专一性和组织特异性,且ISP2在妊娠早期的小鼠子宫内膜腺上皮有特异性的高表达.ISP2抗体的获得为进一步研究ISP2在着床中的功能奠定了基础.
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