研究背景：类风湿关节炎(RA)是一种以累及周围关节为主的系统性炎症性自身免疫病，致残率高。多年来，尽管学术界对RA的发病机制及治疗策略进行了广泛深入的研究，但其病因及发病机制仍远未明晰，治疗效果也难尽人意。约50％的病人在1～2年内可发生关节破坏，大多数患者出现程度不等的功能受损和关节畸形。RA是造成我国人群丧失劳动力和致残的主要疾病之一。近年来研究表明，高迁移率族蛋白1(HMGBl)作为一种炎症因子，可能与RA的发病有密切关系。既往研究发现tMGB l在佐剂性关节炎大鼠的滑膜细胞胞浆和间质内表达异常，在RA患者关节液中表达显著增高，而血清HMGB1水平是否增高存在争议。血清中HMGB1水平与疾病活动性指标的关系，HMGBl在RA患者外周血单个核细胞(PBMC)中的变化如何，HMGBl是否与关节破坏有关，以及常用抗风湿药对HMGBl的表达是否存在影响目前尚无相关研究。 第一部分类风湿关节炎外周血和关节液中 ItMGBl的表达及临床意义 目的：探讨RA患者PBMC及血清和关节液中HtMGBl表达状况，并与疾病活动指标及其它临床指标进行相关性分析，寻找反映RA病情活动、骨质破坏的新指标。 方法：选择活动期RA患者38例和非活动期RA患者24例及健康对照20例，采集外周血；选择RA和骨关节炎(OA)患者各12例，采集关节液。采用RT-PCR检测PBMC中HMGBlmRNA表达水平，Western blot检测PBMC、血清和关节液中HMGBl蛋白水平。对血清中HMGBl水平与病情活动指标及其它临床指标进行相关性分析。 结论：HMGBl在活动期RA患者PBMC中表达下调，而血清表达上调，且血清HMGBl与ESR、CRP、RF呈正相关，这提示血清HMGBl可作为RA病情活动指标之一。 第二部分HMGBl在大鼠佐剂性关节炎发病中的作用研究 目的：观察HMGBl在佐剂性关节炎(AA)大鼠滑膜、关节和血清中的表达，探讨HMGBl在AA滑膜炎和关节破坏中的作用。 方法：30只雄性SD大鼠分为2组，15只为正常对照组，15只为AA组。AA组采用完全弗氏佐剂(CFA)造模。每两天对大鼠进行关节肿胀评分。第18天处死所有大鼠，心脏采血，采用Western blot检测血清中HMGBl的表达，对滑膜、关节进行病理组织学检查和免疫组化检测HMGBl的表达。 结论：HMGBl在AA大鼠滑膜、软骨区、骨质破坏区的胞浆中表达明显增强，血清中HMGBl水平升高。这提示HMGBl可能在AA软骨和骨质破坏病理过程中发挥了重要作用。 第三部分 云克对大鼠胶原性关节炎骨质破坏的抑制作用 及对I-IMGBl的影响 目的：探讨云克对胶原性关节炎(CIA)的炎症、骨质破坏的治疗作用及其对HMGBl的影响。 方法：50只雄性SD大鼠随机取8只作为正常对照组，其余造模。造模第28天，选取关节炎指数>6分、Larsen评分>1分的大鼠共20只，随机分为模型对照组和云克治疗组。云克治疗组静脉注射MDP4mg／kg每日1次，模型对照组和正常对照组注射等体积生理盐水每日1次，持续20天。肉眼观察足肿胀并进行关节炎指数(AI)评分，组织病理学对滑膜炎评分，放射学和组织病理学对骨质破坏进行评分。第49天处死所有大鼠，、心脏采血，放免法检测血清TNF-α,Westem blot检测血清中HMGBl蛋白水平。免疫组化检测HMGB l在踝关节软骨和骨质区的表达。 结论:云克可抑制CIA滑膜炎症及骨质破坏。云克可能通过抑制HMGB1在软骨和骨质破坏区细胞胞浆中的表达、降低血清TNF-α和HMGB1水平发挥治疗作用。