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近年来,设施黄瓜(Cucumis sativus)连作土壤中南方根结线虫(Meloidogyne incognita, M.i)数量及其病情指数逐年增加,生产上迫切需要绿色高效的防控技术。丛枝菌根真菌(arbuscular mycorrhizal fungi,AMF)能够与绝大多数植物的根系共生形成互惠共生体,具有显著的促生抗病作用。业已表明,AMF与暗隔内生真菌(dark septate endophytes, DSE)在根围亲密接触、相互影响、共同发生发展。大量研究表明,DSE具有与AMF相似的生理生态学功能,并且二者各自的生理生态效应与机制已分别给予了众多的研究。然而,AMF与DSE的相互作用及其效应则知之甚少。本研究旨在确定AMF与DSE相互作用关系的基础上,评价AMF+DSE不同组合对黄瓜促生防病的效应,初步探索AMF+DSE防控黄瓜根结线虫病的机制,为探索绿色防控根结线虫病提供思路和可能的新途径。 本研究获得的主要结果如下: 1.设施栽培黄瓜根围土壤中鉴定出AMF9属20种;自根系中分离鉴定到5属7种;从根系中分离获得6个DSE菌株,其中1株为Phoma leveillei(P.l)。黄瓜以盛果期的AMF孢子密度最高、盛果末期的种丰度最高、苗期的孢子密度和种丰度都是最低的。以莱阳样地的AMF孢子密度和种丰度最高,寿光的最低。设施栽培黄瓜根系可观察到典型的AMF丛枝、泡囊、DSE菌丝和微菌核等结构。 2. AMF与DSE在侵染、定殖和促进黄瓜植株生长方面存在互作,AMF显著促进DSE的侵染和定殖,DSE也能提高AMF的侵染率和定殖量。AMF和DSE定殖率显著优于单接种AMF或DSE处理的,其中以F.m+P.l侵染率最高。接种AMF、或/和DSE均不同程度的促进了黄瓜植株的生长发育,以AMF+DSE处理的各生长指标显著优于单接种AMF或DSE的处理,其中以F.m+P.l组合促生效应最优。 3.接种AMF、或/和DSE均不同程度抑制了M.i的繁殖,AMF+DSE处理的根内雌虫数、卵块数、每个卵块含卵量、发病率和病情指数显著低于对照和单接种AMF或DSE的处理,其中F.m+P.l处理的抗病效应最大,是防治南方根结线虫的最佳组合。 4.接种AMF、DSE、AMF+DSE处理均显著增加了黄瓜叶片内防御酶如(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活性、降低丙二醛(MDA)的含量。表明 AMF+DSE通过相互促进共生体发育、增大A型丛枝结构比率、诱导和提高防御性酶活性、降低丙二醛对细胞膜伤害等机制提高植物抗线虫病。 本研究结果丰富了栽培作物根内AMF和DSE多样性研究内容,特别是确定的能协同降低根结线虫病害的优良AMF+DSE组合,不仅可为下一步开展大田试验奠定了基础、创造了条件,而且对进一步探讨防控根结线虫病的途径提供了新思路和技术基础。