【摘 要】
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目的:分析癫痫发作后24 h内P2X7受体(P2X7R)和神经连接蛋白(NLGN)的表达特点,并探讨P2X7R抑制剂影响癫痫持续状态发作程度的可能机制。方法:将健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为6组,分别为1 h、3 h、6 h、12 h、24h组及空白对照组(每组3只);除对照组外,其余组均制备为氯化锂-匹鲁卡品癫痫模型,Racine评分量表评级达4或5级为造模成功。依次于癫痫发作后1 h、3
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目的:分析癫痫发作后24 h内P2X7受体(P2X7R)和神经连接蛋白(NLGN)的表达特点,并探讨P2X7R抑制剂影响癫痫持续状态发作程度的可能机制。方法:将健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为6组,分别为1 h、3 h、6 h、12 h、24h组及空白对照组(每组3只);除对照组外,其余组均制备为氯化锂-匹鲁卡品癫痫模型,Racine评分量表评级达4或5级为造模成功。依次于癫痫发作后1 h、3 h、6 h、12 h及24 h将各组大鼠处死,空白对照组与1 h组一同处理,采用蛋白免疫印迹法检测P2X7R、NLGN1及NLGN2在各组大鼠海马和内嗅皮质中的表达情况。进一步按随机数字表法将健康雄性SD大鼠分为干预组(造模前腹腔注射P2X7R抑制剂+载体)和对照组(造模前腹腔注射等剂量生理盐水+载体),每组3只。记录两组大鼠药物诱发癫痫的潜伏时间,以判断癫痫发作程度;之后采用蛋白免疫印迹法检测两组大鼠海马和内嗅皮质中NLGN1、NLGN2的表达情况,以判断P2X7R抑制剂对其表达的影响结果:按照Racine评分量表分别对1 h、3 h、6 h、12 h及24 h组大鼠进行评级,均达到4或5级;15只均造模成功。蛋白免疫印迹法结果显示,癫痫发作后1 h或3 h,P2X7R、NLGN1及NLGN2在癫痫模型海马和内嗅皮质中的相对表达量,海马:分别1.194±0.053、2.367±0.336、2.319±0.234;内嗅皮质:分别为1.185±0.104、2.094±0.178、1.512±0.332均高于对照组海马:1.014±0.046、1.108±0.101、1.134±0.177,内嗅皮质:0.917±0.081、1.046±0.093、1.017±0.028;均p<0.05;且随发作时间延长均有降低的趋势(均p<0.001)。干预组药物诱发癫痫的潜伏时间较对照组长分别为(34.5±2.6)min、(20.0±3.1)min,p=0.029。蛋白免疫印迹法检测结果显示,干预组海马中NLGN1和NLGN2的相对表达量NLGN1:0.678±0.011;NLGN2:0.904±0.060均低于对照组NLGN1:1.031±0.039,NLGN2:1.135±0.079;均p<0.05,而内嗅皮质中NLGN1和NLGN2的相对表达量,两组间差异均无统计学意义(均p>0.05)。结论:癫痫发作后24 h内,P2X7R和NLGN蛋白在海马和内嗅皮质中的表达量均明显增加,且随发作时间延长呈降低的趋势;P2X7R抑制剂可通过抑制海马区NLGN1的表达进而影响癫痫持续状态的发作程度。
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