湿×加杂交松(Pinus elliottii×Pinus caribaea)是指湿地松(Pinus elliottii)与加勒比松(Pinus caribaea)的杂交后代。湿×加杂交松由于其生产力高、适应性强等优点而深受群众喜爱,近年来,在我国南方地区推广面积不断扩大。由于湿×加杂交松种子产量低、生产成本高,因而种苗数量不足的问题日益突出。因此,利用组织培养方式快速扩大繁殖杂交松种苗具有重要的意义。 本试验以当年生的幼嫩茎段为外植体对杂交松直接器官发生和植株再生进行了研究。 对于带菌较多的枝条,通过认真刷洗后再用自来水冲洗,然后进行75%酒精10秒+0.1%升汞6分钟的灭菌可达到较好的灭菌效果。 几个对比试验的结果表明,以东门林场苗圃的叶腋处带有针叶苞的杂交松茎段作为外植体对于腋芽的诱导比较有利。且只有茎段的基部及中部的腋芽才能诱导出来。DCR培养基比较适合于茎段腋芽的诱导。DCR培养基附加一定浓度的6-BA和NAA可诱导腋芽长出。当6-BA的浓度为1mg/L、NAA的浓度为0.05～0.15mg/L或者6-BA的浓度为2mg/L、NAA的浓度为0.1～0.2mg/L时,腋芽的诱导率比较高且诱导出的腋芽生长发育正常;培养基中蔗糖含量为40g/L时比较适宜于腋芽的诱导。 已分化萌出的腋芽继代到无激素的或添加适量NAA(0.05～0.1mg/L)