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目的:通过观察清热化痰方(以下简称W)及其两个拆方,清热方(以下简称Q),化痰方(以下简称H)对人脑胶质瘤细胞SHG-44增殖抑制和EGFR-PI3K-Akt信号转导通路的影响,研究清热、化痰法治疗人脑胶质瘤的机理,探讨热毒及痰凝与人脑胶质瘤病变和EGFR-PI3K-Akt信号转导的关系。 方法:采用人脑胶质瘤细胞SHG-44为实验对象,用倒置显微镜观察细胞生长情况,MTT法计算细胞抑制率,筛选出有效药物;选用正交设计试验选出疗效最佳的方剂;设对照组和用清热化痰方及其两个拆方处理细胞,在倒置显微镜下观察SHG-44细胞生长状态及形态改变,用Westernblot检测各药物组对SHG-44细胞EGFR-PI3K-Akt信号转导通路各蛋白表达的影响。 结果:①清热化痰方及其拆方对SHG-44细胞增殖显著抑制,对细胞形态较大影响,清热组多数细胞缩小,细胞间隙加大,不少细胞发生空泡变性;化痰组细胞形态发生改变,部分变圆,细胞表面粗糙,透光度减低,贴壁性变差;全方组细胞表面粗糙,细胞缩小,变圆,呈现空泡样结构。②清热化痰方及其拆方均能抑制SHG-44细胞生长,全方作用最强,随药物浓度、时间的增加,对细胞增殖抑制呈现剂量-效应与时间-效应依赖关系。③人脑胶质瘤SHG-44细胞可检测到EGFR、PI3K、Akt蛋白分子的过度表达。④当用IC50药物浓度处理细胞时,清热化痰方及其拆方均能下调EGFR-PI3K-Akt信号通路各蛋白表达水平。 结论:①清热化痰方及其拆方均能显著抑制人脑胶质瘤SHG-44细胞的生长,全方组效果最好,清热、化痰两法联用具有协同作用。②脑胶质瘤发病和EGFR-PI3K-Akt转导通路信号增强密切相关。③清热化痰方及其拆方均能下调SHG-44细胞EGFR-PI3K-Akt信号通路各蛋白表达水平,清热、化痰及合方抑制脑胶质瘤细胞增殖与抑制EGFR-PI3K-Akt信号转导相关。④通过药效反证,在人脑胶质瘤病变中,热毒、痰凝与EGFR-PI3K-Akt信号表达和转导增强密切相关。