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目的:通过复制糖尿病动物(大鼠)模型,观察不同病程红细胞聚集指数、低切变率全血黏度值及血脂的动态变化,探讨红细胞聚集性与血脂之间的内在联系,为临床糖尿病并发症的早期防治提供实验依据。
方法:选择清洁级7周龄Wistar大鼠120只,雌雄各半,,体重180-220g,适应性喂养两周后将大鼠按随机数字表法分为实验组(TRI)和对照组(CON)。实验组70只,雌雄各半,对照组50只,雌雄各半,实验组喂以高脂饲料,对照组喂以普通饲料(基础饲料)。两个月后将链脲佐菌素(STZ)用0.1mol/L(PH4.4)的柠檬酸缓冲液配成5mg/ml的溶液(STZ均要求现用现配),实验组大鼠按30mg/kg体重的剂量一次性腹腔内注射STZ,对照组大鼠腹腔内注射等体积的柠檬酸缓冲液。一周后所有大鼠做OGTT:50%葡萄糖2g/kg灌胃,以空腹血糖大于7.0mmol/l和2小时血糖大于11.1mmol/l作为成摸标准。实验组大鼠共有61只造模成功,成模率87.1%,。从实验组选取空腹血糖水平较高的50只大鼠,雌雄各半,作为糖尿病组(DIA),对照组50只大鼠作为正常组。采用随机数字表随机将正常组和糖尿病组各分为0周、4周、8周、12周、16周5组,正常组每组10只,糖尿病组每组10只(均为雌雄各半),分别于以上时段空腹取血测定观测值。正常组喂普通饲料,糖尿病组则继续喂高脂饲料。
于实验第0、4、8、12、16周分别对相应组大鼠采血测各观测指标。实验室温度控制于24-26℃,湿度为45-50%,待测大鼠禁食10-12小时,1%水合氯醛腹腔注射麻醉(0.3-0.5mg/100g),待麻醉成功后仰卧固定于操作台上,腹正中切口,暴露下腔静脉,近心端结扎,远心端置结扎线备用。5号针头10ml开腹下腔静脉取血7ml,5ml放入肝素抗凝管交专人立即测血液流变学指标,即红细胞聚集指数和低切全血黏度值;2ml室温下自然凝固,1500转/分离心10分钟后,分离血清,置于-80℃超低温冰箱保存,待标本收集完全后同批采用全自动血液生化仪测定血脂四项指标即甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)。采血后结扎下腔静脉远心端。所有数据输入SAS软件包进行统计,计量资料用均数±标准差表示,多组间的比较采用完全随机设计的单因素方差分析和Q检验,两组间的比较采用t检验,两变量间线性关系采用直线相关分析,多变量间线性关系采用多元回归分析。a定为0.05,P<0.05为有统计学意义。
结论:本实验表明2型糖尿病大鼠的红细胞聚集性与血脂有着明确的相关关系,在一定的血糖水平随着甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇的升高、高密度脂蛋白胆固醇的降低,红细胞聚集性也增强。红细胞聚集指数、低切全血黏度值是反映红细胞聚集性的重要指标,临床上对2型糖尿病患者进行早期有效的调脂治疗,对于改善微循环,降低糖尿病并发症的发病率、改善预后具有积极的临床意义。