【摘 要】
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促肾上腺皮质激素释放激素和尾加压素-1（CRH1a/UTS1）是促肾上腺皮质激素释放激素家族的成员,在许多脊椎动物体内存在并广泛分布。它们在哺乳动物的功能主要集中在应激、生殖、生长等方面,但是其在鱼类垂体中的功能研究相对较少。基于此,本论文以草鱼垂体为研究对象,阐释CRH1a/UTS1在草鱼垂体中的功能及其作用机制。主要研究结果如下所示:首先,获得了CRH1a/UTS1及其受体的序列,以此为基础进
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促肾上腺皮质激素释放激素和尾加压素-1（CRH1a/UTS1）是促肾上腺皮质激素释放激素家族的成员,在许多脊椎动物体内存在并广泛分布。它们在哺乳动物的功能主要集中在应激、生殖、生长等方面,但是其在鱼类垂体中的功能研究相对较少。基于此,本论文以草鱼垂体为研究对象,阐释CRH1a/UTS1在草鱼垂体中的功能及其作用机制。主要研究结果如下所示:首先,获得了CRH1a/UTS1及其受体的序列,以此为基础进行了序列比对分析、组织表达分析和受体配体验证。克隆草鱼CRH1a/UTS1及其受体的序列,通过序列分析发现,CRH1a成熟肽序列在草鱼和斑马鱼中的相似度较高,有七个氨基酸的差异;UTS1成熟肽序列在草鱼与斑马鱼中只有一个氨基酸的差异。组织表达分析显示CRH1a＆UTS1及其受体CRHR1＆CRHR2在草鱼脑中主要存在于下丘脑、垂体、小脑等组织,在外周组织中则主要分别于性腺和肾脏。最后,我们通过受体配体验证发现CRH1a/UTS1都能激活两个受体,其中CRH1a对CRHR1的激活力高些,而UTS1对CRHR2的激活力高些。其次,阐明了CRH1a/UTS1调节草鱼垂体中促生长泌乳素α（somatolactinα,SLα）和促生长泌乳素β（somatolactinβ,SLβ）合成与分泌的作用机制。首先,利用转录组分析发现CRH1a和UTS1均能够诱导草鱼垂体细胞中SL基因的m RNA表达。进一步研究发现,CRH1a和UTS1不仅能够以时间和剂量依赖性趋势诱导草鱼垂体细胞中SLα和SLβm RNA表达,而且能够显著诱导垂体细胞中SLα和SLβ的分泌。最后,利用一系列信号通路抑制剂同CRH1a或UTS1共同处理草鱼垂体细胞发现CRH1a和UTS1主要通过c AMP/PKA、PLC/IP3/P-KC和Ca2+/Ca M/Ca MK-Ⅱ三条通路诱导垂体SLα和SLβ的合成与分泌。
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