目的:1.观察5-Fu腹腔注射对SD大鼠小肠结构及肠屏障功能的影响,比较一次性给药和分次连续给药方案对小肠粘膜的损伤作用;2.探讨长双歧杆菌对5-Fu引起的大鼠肠屏障功能损伤的保护作用及机制。方法:SD大鼠72只随机分为6组,每组12只。对照组(A)、小剂量5-Fu组(B)、小剂量5-Fu联合双歧杆菌组(C);对照组(D)、大剂量5-Fu组(E)、大剂量5-Fu联合双歧杆菌组(F)。B组、C组每天腹腔注射5-Fu 40mg/kg D1-5天,A组注射等比例生理盐水;C组每天予双歧杆菌溶解液1ml灌胃(含长双歧杆菌1×1010cfu/ml )D1-7天,A组、B组等容积生理盐水灌胃。E组、F组腹腔注射5-Fu 500mg/kg D1天,D组注射等容积生理盐水;F组每天予双歧杆菌溶解液1ml灌胃(含长双歧杆菌1×1010cfu/ml )D1-7天,D组、E组等容积生理盐水灌胃。实验中观察动物体重变化并对腹泻情况进行评分。于实验第四天和第八天处死每组各6只动物,活体取小肠组织观察肠粘膜病理学变化,采用免疫组化方法测定小肠粘膜occludin蛋白、sIgA、PCNA表达。结果:1.各实验组大鼠体重变化实验过程中对照组A对照组D体重进行性增加,增加量差别无统计学意义。实验第四天B组、C组、E组、F组体重明显下降,与对照组有显著性差异(P<0.05),C组体重下降小于另外三组,差异有统计学意义(P<0.05)。实验第八天B组、C组、E组、F组大鼠体重进一步下降,F组体重下降明显少于其他三组,差异有统计学意义(P<0.05)。2.各实验组大鼠腹泻情况实验第4天,E组腹泻程度最严重,C组好于B组,F组好于E组,B组好于E组,差异有统计学意义,P,0.01;F组C组之间无差别。实验第8天,B组腹泻程度最严重,C组好于B组,F组好于E组,E组好于B组,F组好于C组,差异有统计学意义,P,0.01。3.各实验组大鼠病理评分实验第4天,E组病理评分最差,C组好于B组,F组好于E组,B组好于E组,差异有统计学意义,P,0.01;F组C组之间无差别。实验第8天,B组病理评分最差,C组好于B组,F组好于E组,E组好于B组,F组好于C组,差异有统计学意义,P,0.01。4.各实验组大鼠PCNA、Occludin蛋白、sIgA表达情况B组、C组实验第4天occludin蛋白、sIgA表达下降,PCNA表达上升,与对照组相比差异有统计学意义,P<0.05。C组occludin蛋白、sIgA、PCNA表达较B组高,差异有统计学意义,P<0.05。实验第8天occludin蛋白、sIgA表达进一步下降,PCNA表达下降, C组occludin蛋白、sIgA较B组高,PCNA表达较B组低,差异有统计学意义,P<0.05。E组、F组实验第4天occludin蛋白、sIgA表达下降,PCNA表达上升,与对照组相比差异有统计学意义,P<0.05。F组occludin蛋白、sIgA、PCNA表达较E组高,差异有统计学意义,P<0.05。实验第8天occludin蛋白、sIgA表达有所上升,但仍低于对照组,与对照组相比差异有统计学意义,P<0.05。PCNA表达下降但仍高于对照组,E组与对照组相比差异有统计学意义,P<0.05。F组occludin蛋白、sIgA较E组高,PCNA表达较E组低,差异有统计学意义,P<0.05。B组与E组,C组与F组之间,实验第4天occludin蛋白、sIgA、PCNA表达差异无统计学意义,实验第8天E组、F组occludin蛋白、sIgA、PCNA表达均高于B组、C组,差异有统计学意义,P<0.05。结论1.腹腔注射5-Fu能成功建立大鼠小肠黏膜损伤-修复模型,大鼠表现出腹泻次数和腹泻量的增加及相应的体重下降,小肠形态学改变表现为绒毛坏死,隐窝消失,肠屏障功能改变表现为机械屏障功能受损(肠黏膜Occludin蛋白表达减少)、肠免疫屏障受损(肠黏膜sIgA含量下降),同时肠上皮再生修复能力下降(PCNA含量下降)。5-Fu 500mg/kg一次性腹腔注射大鼠在停药1周后肠粘膜损伤可以逐步修复。大鼠5-Fu腹腔注射连续五天的给药方式较一次性给药方式所造成的肠粘膜损伤更为严重。2.长双歧杆菌灌胃能在一定程度上减轻5-Fu腹腔注射大鼠小肠粘膜结构的破坏,减轻腹泻症状,减轻体重丢失;能增加5-Fu腹腔注射大鼠小肠粘膜Occludin蛋白及sIgA表达;能增加化疗损伤期大鼠小肠粘膜的PCNA含量,促进肠上皮损伤的修复。