农业废弃物静态高温堆腐微生物菌剂研究

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在农业废弃物的好氧堆肥过程中,微生物起着至关重要的作用。本研究选择目前我国数量多、分布广的鸡粪、小麦秸秆为主要材料,采用堆肥装置,分离农业废弃物堆肥中不同温度阶段的微生物菌株,并从分离的菌株中初选出具有较强纤维素水解能力、蛋白质水解能力、淀粉水解能力的菌株,将这些水解能力强的菌株组合成对农业废弃物堆肥降解的优势复合微生物菌剂。通过对加入复合菌剂后的农业废弃物堆肥过程中水解酶和氧化还原酶动态变化进行研究,推测复合微生物菌剂对堆肥的进程和强度的影响,同时对农业废弃物堆肥过程的腐熟指标进行测定,判断筛选的复合微生物菌剂在农业废弃物高温堆肥中的作用效果。研究的主要结果如下:1、以鸡粪小麦秸秆等农业废弃物自然堆肥不同阶段的堆料为分离源,在中温(35℃)和高温(50℃)两种温度范围条件下进行菌种分离。对分离得到的菌株通过形态学观察进行归类,利用淀粉降解、明胶水解、纤维素水解试验从分离的微生物中筛选具有淀粉、蛋白质和纤维素降解能力的菌株A2、A4、A6、A8、AH2、AH3、AH4、B1、B21、B22、B24、BH2、BH5、BH7、J1、J3、J4、JH1、JH2、JH3、M3、M5、M10作为被选高效微生物,将获得的这些菌株组合成复合微生物,通过对鸡粪小麦秸秆的物质降解正交试验,筛选出对农业废弃物降解具有明显促进作用的最优菌株组合CM1(菌株为B21,BH2,A8,AH3,M10,J4,JH1)。鸡粪秸秆混合物降解率试验表明,加入CM1菌剂的物质的降解率达到53.29%,呈极显著大于其它菌株组合对物质的降解率。所有菌剂组合对鸡粪、小麦秸秆的降解率也均极显著的高于不添加菌剂处理的降解率,说明加入复合微生物菌剂对鸡粪、小麦秸秆的降解有明显的促进作用,因此,组合CM1可以作为鸡粪、小麦秸秆降解的首选外源复合微生物。2、在静态通气条件下,以鸡粪、小麦秸秆和花椒粕与为原料,加入复合微生物菌剂CM1和不加菌剂在堆腐过程中纤维素酶、蔗糖酶活性的变化趋势基本一致,但加入CM1处理的两种酶的活性高峰值都高于CK处理,其峰值分别达到了0.192 mg glucose.(g.24h)-1和20.736 mg glucose.(g.24h)-1。加入CM1的温度在第4天达到最大值67.2℃,纤维素酶活性第16天达到高峰值0.192mg.glucose.(g.24h)-1;而CK处理的堆肥温度在第6天达到最大值65.1℃,在第18天达到高峰值0.135 mg glucose.(g.24h)-1。加入CM1处理的蔗糖酶活性第14天达到高峰值20.736 mg glucose.(g.24h)-1;CK处理的堆料第6天温度达到最大值65.3℃,蔗糖酶活性在第天16达到高峰值16.421 mg glucose.(g.24h)-1;加入CM1处理的脲酶活性第18天出现高峰值0.863 mg NH3(g.24h)-1,CK处理的脲酶活性在第20天出现高峰值0.692mg NH3(g.24h)-1。加入复合微生物CM1处理的堆肥纤维素酶、蔗糖酶和脲酶三种酶活性高峰值的出现均早于CK处理两天出现,加入微生物菌剂CM1能提高酶活性水平及其峰值。3、堆腐过程氧化还原酶活性变化研究表明,添加微生物菌剂CM1处理的过氧化氢酶活性在第3天达到峰值1705ml 0.001N高锰酸钾·g-1·(20min)-1,CK处理的在第4天达最大值1697ml 0.001N高锰酸钾·g-1·(20min)-1;添加菌剂处理的脱氢酶活性第10天达最大值8.39μl H+·g -1·(24h) -1,CK处理的在第12天达峰值6.57μl H+·g -1·(24 h) -1;多酚氧化酶加菌剂处理在第18天达峰值7.33没食子素·g -1·(2h) -1,CK处理的在第32天达最大值6.65没食子素·g -1·(2h) -1。同时,从堆肥的整个过程看添加微生物菌剂处理的酶活性上升较快,而且酶活性的最大值也比CK处理的酶活性要高。加菌剂处理的过氧化氢酶活性在整个堆肥过程中基本都高于CK处理;加菌剂处理的脱氢酶活性在整堆肥中期中高于CK处理,说明添加菌剂对堆肥的物质分解具有促进作用;在堆肥的前26天加菌剂处理的多酚氧化酶活性高于CK处理的活性,表明微生物菌剂可以促进木质素的降解和其产物的转化。4、以分离筛选的复合微生物菌剂CM1、CM2进行鸡粪麦草堆肥试验。结果表明,鸡粪和麦草在堆肥时加入复合微生物菌剂CM1、CM2后,臭味消除能比对照提早15-20d,其0~15d的氨气释放平均浓度比对照处理的氨释放浓度分别低6.8%和9.3%,同时硫化氢释放浓度在堆制过程中始终低于对照处理,达到了较好的除臭效果;加入菌剂使堆料温度≥60℃的时间达到6-9d,在堆制各时期NH4+-N的平均浓度顺序为处理Ⅱ<处理Ⅰ<CK,在堆肥结束时(35d)的NO3--N含量,以处理Ⅰ和处理Ⅱ的较高,达到了0.121 g·kg-1和0.137 g·kg-1,表现出了除臭和保氮的效果,使堆肥后的有机质、总氮、全磷、全钾含量增加显著,其增幅分别为18.6%、14.6%、15.6%和9.4%,且符合粪便无害化卫生标准,同时加入复合微生物菌剂后能使堆肥在第15天达到腐熟指标。
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