目的建立基于新型核酸酶传感器(铅离子特异性DNA酶)的血铅检测体系,并对该体系应用于临床检测进行方法学评价。方法一、离子特异性DNA酶检测人体全血铅方法的建立全血样本经聚乙二醇辛基苯基醚处理使红细胞裂解,依次使用蛋白酶K消化、硝酸及三氯乙酸处理后使蛋白消化沉淀,铅元素以二价离子形式释放至反应溶液中。溶液中的铅诱导铅离子特异性DNA酶切割荧光基团和淬灭基团释放荧光信号。荧光增长速率与铅离子浓度成正比。以标准铅溶液制作标准曲线,确定检测线性范围,测定血铅标准物质以评价准确度、精密度及回收率。铅离子特异性DNA酶应用于临床全血铅检测的方法学比较研究选择44例临床全血样本,分别采用石墨炉原子吸收光谱法和铅离子特异性DNA酶法检测血铅含量,对两种检测方法得到的数据分析处理,评价其相关性。结果一、铅离子特异性DNA酶检测人体全血铅方法的建立成功建立铅离子特异性DNA酶测定全血铅的样本前处理方法及检测体系。检测线性范围良好(0-2000nmol/L,r2=0.9988),方法检出限2.20nmol/L。血铅标准物质检测的准确度及精密度良好,相对标准偏差分别为4.99%和1.35%,方法回收率89.06%-97.06%。二、铅离子特异性DNA酶应用于临床全血铅检测的方法学比较研究本课题建立的铅离子特异性DNA酶血铅测定方法与国际推荐的石墨炉原子吸收光谱法相比简便快速。检测44例临床全血样本,两种方法检测结果间相关性良好(r=0.9872),无显著性差异。结论本实验建立的新型核酸酶传感器检测方法可以快速、准确地对血铅进行定量分析,为临床诊断提供帮助。