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目的:观察乔松素减轻小鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的药效作用,并探讨其减轻UC的作用机制,为UC治疗药物的开发提供理论依据和参考。方法:体内药效学评价:葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)诱导小鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)模型,通过小鼠的腹泻血便、体重、结肠形态及长度、组织病理切片及评分等指标评价乔松素减轻UC的药效作用。体外药效学评价:运用CCK-8试剂盒检测乔松素对RAW264.7细胞活力的影响。Griess试剂检测乔松素对RAW264.7炎症细胞模型NO分泌的影响。运用WB、q-PCR等技术研究评价乔松素对RAW264.7炎症细胞模型炎性因子和炎症介质表达的影响。药理机制研究:对小鼠粪便进行16s RNA测序,探讨乔松素对UC模型小鼠肠道菌群(有益菌和病原菌)的影响。WB、q-PCR等技术评价乔松素对肠上皮Caco-2细胞紧密连接蛋白(ZO-1、Claudin-1、Occludin,JAM-A)表达的影响。然后进一步研究评价乔松素对UC小鼠模型结肠组织中TLR4/NF-κB、炎性小体NLRP3信号通路及相关炎症介质和炎性因子表达的影响。WB、q-PCR、免疫荧光染色等实验检测乔松素对RAW264.7炎症细胞模型TLR4/NF-κB信号通路的影响。分子对接实验研究乔松素与MD-2蛋白的结合模式,然后运用免疫共沉淀、WB等实验进一步探讨乔松素阻断TLR4信号传导的机制。PMA和LPS构建THP-1炎性小体激活模型,WB、免疫荧光染色等技术研究乔松素对NLRP3信号通路及ASC斑点蛋白形成的影响。结果:体内药效评价:乔松素显著改善UC小鼠的精神萎靡、体重下降,腹泻便血等疾病症状。结肠组织的观察测量及组织病理切片评分显示乔松素显著改善UC鼠结肠长度的缩短,以及肠黏膜的水肿充血、上皮细胞损伤,炎性细胞浸润等病理损伤。体外药效评价:乔松素不存在细胞毒作用,并呈剂量依赖性的抑制RAW264.7炎症细胞模型的NO分泌。乔松素显著抑制LPS诱导的RAW264.7细胞炎症介质(COX-2、i NOS)和炎性因子(TNF-α、IFN-γ、IL-6等)的表达。药理机制研究:小鼠粪便的菌群测序分析显示,UC模型鼠的菌群结构和丰度较正常鼠差异显著,肠道微生态失调。较模型组,乔松素给药组的菌群紊乱程度有所改善,菌群多样性丰度也有所增加,一定程度上肠道微生态失调。乔松素促进肠上皮Caco-2细胞紧密连接蛋白(ZO-1、Claudin-1、Occludin,JAM-A)的表达。WB、q-PCR、免疫荧光染色、分子对接实验结果显示,乔松素可显著抑制UC模型鼠结肠组织TLR4/NF-κB,NLRP3信号通路的异常激活,并且乔松素可能通过竞争性抑制LPS与MD-2蛋白的结合,阻断TLR4炎症信号的传导,最终抑制TLR4/NF-κB信号通路的异常激活。并且通过抑制NLRP3信号通路的相关蛋白表达以及抑制NLRP3炎性小体的装配,抑制NLRP3信号通路的过度激活。结论:乔松素可减轻DSS诱导的小鼠UC,作用机制可能与调节肠道菌群、增加肠黏膜屏障、以及抑制肠道固有免疫TLR4/NF-κB、NLRP3信号通路的过度激活相关。