【摘 要】
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目的:探讨曲妥珠单抗联合洛铂(lob)对HER2阳性卵巢癌SKOV-3细胞的抑制作用及其机制。方法:将SKOV-3细胞分为对照组、洛铂组(1μg/ml)、曲妥珠单抗组(10μg/ml)和联合组(洛铂1μg/ml+曲妥珠单抗10μg/M)。采用MTT法检测药物对细胞增殖的抑制作用,并分析药物对细胞增殖的抑制率。流式细胞仪分析用于检测细胞周期分布。进行了免疫印迹以检测Akt,p53,Bcl-2和Bax
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目的:探讨曲妥珠单抗联合洛铂(lob)对HER2阳性卵巢癌SKOV-3细胞的抑制作用及其机制。方法:将SKOV-3细胞分为对照组、洛铂组(1μg/ml)、曲妥珠单抗组(10μg/ml)和联合组(洛铂1μg/ml+曲妥珠单抗10μg/M)。采用MTT法检测药物对细胞增殖的抑制作用,并分析药物对细胞增殖的抑制率。流式细胞仪分析用于检测细胞周期分布。进行了免疫印迹以检测Akt,p53,Bcl-2和Bax蛋白的蛋白表达。结果:1.MTT结果表明,不同浓度的曲妥珠单抗(0.1μg/ml、1μg/ml、10μg/ml、100μg/ml)分别持续24h、48h、72h和96h、对SKOV3细胞无细胞毒性(P>0.05)、与对照组相比、曲妥珠单抗组(10μg/ml)无毒性(P>0.05)、洛铂组(1μg/ml)轻度有毒性(P>0.05)、联合组可增强SKOV-3细胞的细胞毒性、差异有统计学意义(P<0.05)。两药联合作用指数CI为1.2、属于协同作用。2.流式细胞仪周期分布结果表明:(1)与对照组相比、曲妥珠单抗对SKOV-3细胞的细胞周期分布无显著性影响(P>0.05)、洛铂单独用药时SKOV-3细胞中G0/G1期的分布比例轻度降低(P>0.05)、曲妥珠单抗联合洛铂则显著降低了SKOV-3细胞中G0/G1期的分布比、差异有统计学意义(P<0.05)。(2)与对照组相比,曲妥珠单抗对SKOV-3细胞的细胞周期分布无显著性影响(P>0.05)、洛铂单独用药时SKOV-3细胞中S期的分布比例轻度降低(P>0.05)、曲妥珠单抗联合洛铂则显著降低了SKOV-3细胞中S期的分布比、差异有统计学意义(P<0.05)。(3)与对照组相比、曲妥珠单抗组对SK OV-3细胞的G2/M期分配比无明显影响(P>0.05)、但在洛铂组SKOV-3细胞中G2/M期的分布比例轻度降低(P>0.05)、联合组中SKOV-3细胞的分配比显著增加、差异有统计学意义(P<0.05)。这些结果表明曲妥珠单抗联合洛铂明显引起细胞周期分布的停滞。3.免疫印迹分析结果表明:(1)p-AKT的蛋白质表达;与对照组相比、曲妥珠单抗组表达轻度减弱(P>0.05)、洛铂组表达轻度减弱(P>0.05)、联合处理组表达明显减弱,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)p53的蛋白表达:与对照组相比、曲妥珠单抗组表达轻度减弱(P>0.05)、洛铂组表达轻度减弱(P>0.05)、联合组有显著性增强、差异有统计学意义(P<0.05)。(3)Bax的蛋白质表达:与对照组相比、曲妥珠单抗组表达无明显影响(P>0.05)、洛铂组表达轻度增强(P>0.05)、联合组表达明显增强、差异有统计学意义(P<0.05)。(4)Bcl-2表达:与对照组相比、曲妥珠单抗组表达无明显影响(P>0.05)、洛铂组表达轻度减弱(P>0.05)、联合组表达减弱、差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1.曲妥珠单抗联合洛铂可能通过抑制细胞周期对人卵巢癌SKOV-3细胞增强细胞毒性作用。2.曲妥珠单抗联合洛铂可能通过下调p-AKT、Bcl-2和上调Bax、P53表达而抑制肿瘤的增殖活性,诱导肿瘤细胞凋亡。3.曲妥珠单抗与洛铂联合用药有可能成为HER-2阳性卵巢癌的临床治疗新模式。
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