山药种质资源遗传多样性的RAPD和AFLP分析

来源 :河南师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liuj_csip
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本文运用RAPD和AFLP标记分别对29个和21个不同来源的山药品种进行了种质资源遗传多样性研究。结果表明:(1)CTAB微量法(采用3%CTAB附加2%β-巯基乙醇和5%PVP作为提取缓冲液,用氯仿/异戊醇抽提一次)提取的山药基因组DNA可以满足RAPD反应。(2)从80条RAPD引物中筛选出20条多态性强的引物,这20条RAPD引物对30份山药材料共扩增出283条带,其中241条带具有多态性,多态性条带百分比为85.16%。将20种引物的扩增图谱进行综合比对分析,可区分开所有的29个品种。(3)RAPD分析的29个山药品种两两之间的Jaccard相似系数在0.28-0.87之间,平均相似系数为0.53。构建的聚类图将30份山药材料划分为4类:偃师野山药1号单独聚为一类;铁棍山药和铁棍山药组培苗聚为一类;小叶山药、花籽山药、日本园山药、白山药、嵩县野山药1号和云台山野山药聚为一类;其他21个品种为一类,主坐标分析结果支持上述的聚类分析结果。(4)适于山药AFLP反应的基因组DNA的提取方法是:用CTAB大量法提取山药DNA,3%CTAB附加3%β-巯基乙醇和5%PVP作为提取缓冲液,醇沉后,用TE溶解取上清再醇沉。(5)FAFLP观察结果,在50-500bp间4对引物组合共扩出790个峰,平均每对引物扩出197.5个峰,记录461个峰,多态性峰百分比高达90.00%。单对引物即可将22份材料完全区分开。(6)AFLP分析的21个山药品种之间的遗传相似程度较低,相似系数在0.36-0.79之间,平均遗传相似系数为0.52。基于AFLP所得聚类图,22份材料划分为4个类群,盾叶薯蓣单独聚类;云台山野山药、日本园山药、小叶山药、白山药聚为一类群;铁棍山药、怀庆1号山药、47号山药和沙滩园山药聚为一类,其他13个不同产地的品种归为一类,主坐标分析分组结果支持聚类分析的结果。本实验建立了山药RAPD和AFLP分析体系,为进行山药药品质量评价、品种的鉴定、选育以及构建山药核心种质,提供了分子水平的依据和技术支持。
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