本试验综合运用植物组织培养及生理生化分析技术，以甘蓝自交不亲和系2000-Ⅰ(亲和指数为0.04)的花粉和柱头为试材，对其离体保存体系、活性鉴定方法、保存前后花粉与柱头相互识别作用等进行了研究，从而建立了甘蓝花粉、柱头可靠有效的离体保存体系。试验结果如下： 在甘蓝盛花期，分别采集开花当天的新鲜花粉和花前1天的花蕾，花蕾在无菌下剥离出柱头。其中花粉用于低温及超低温保存；柱头用于4℃低温保存。 试验中使用电动采粉器收集的花粉，其萌发率和联苯胺着色率与人工收集甘蓝花粉相当，因此可替代人工方法收集花粉。甘蓝花粉离体保存受多种因素影响。保存前脱水至花粉含水量为9.93％～14.18％时，保存效果最好；不脱水(30.49％)或过度脱水(2.07％)，保存效果均差。保存温度为4℃时，花粉活力仅维持1个月左右；保存温度为-20℃、-70℃时，与4℃相比，虽可适当增加保存时间，但其萌发率随保存时间的延长而逐渐降低；保存温度在-196℃(液氮)、6个月后，甘蓝花粉仍有很高的萌发率(36.4%)，且比新鲜花粉高两个百分点左右，表明液氮保存甘蓝花粉具有“冷刺激”效应。保存前预冻处理可提高甘蓝花粉的保存效果，尤其以-20℃预冻处理效果最佳，可使其萌发率达38.17％，同等条件下比未预冻处理36.38%高1.79％。解冻方式是影响甘蓝花粉保存效果的另一个重要因素，室温化冻、水浴化冻，缓慢复苏三种化冻方式中，花粉萌发率分别为32.13％、36.37％、28.70％，表明水浴化冻能提高超低温保存花粉的萌发率，是最理想的化冻方式。 甘蓝柱头低温保存时，运用多种方法鉴定其活性。柱头形态特征观察显示：用二号培养基(含ABA5mg/L+甘露醇20g/L)、六号培养基(ABA5mg/L+甘霹醇30g/L)保存柱头3个月甚至6个月，柱头呈淡绿色，无明显膨大，乳突细胞TTC染色率均在90％以上，与新鲜柱头无明显差异。其余培养基保存的柱头，其形态特征不同程度发生改变。运用组培分生增殖法鉴定柱头活性，仍然以二号、六号培养基上保存的柱头效果最好，6个月时，愈伤组织诱导率分别为79.53％、81.05Q，绿苗分化率分别为93.4896、100％。在二号、六号培养基上保存的甘蓝柱头，脱氢酶分别为618.32mg/(g.h)、617.59mg/(g.h)，与对照621.07mg/L(g.h)无显著差异；且经PAGE电泳表明：保存过程中逐渐适应低温环境，过氧化物酶同工酶先增后减，然后保持在低活性水平；蛋白质先增加，然后动态稳定不变；保存后酌酶同工酶未改变，保持了遗传稳定性。 试验还进行了花粉与柱头相互作用的研究。利用甘蓝材料属孢子体型自交不亲和这一遗传学特性，研究了保存前后甘蓝花粉与柱头相互识别作用，从而进一步证明了花粉、柱头保存体系的可靠性。在保存体系中，用其柱头的蛋白提取液处理花粉，能够降低花粉萌发率，抑制花粉管的伸长；用其花粉外壁蛋白处理柱头乳突细胞，能够诱导胼胝质反应；用离体花粉与离体柱头作用，荧光显微镜下观察显示：花粉很少在柱头表面萌发，进入柱头的花粉管数几乎都小于1。以上试验结果证明：保存体系中的花粉、柱头依然具有自交不亲和性反应，这与新鲜花粉、柱头相互处理的结果一致。