二维氧化锰和氧化钴纳米酶在抗氧化剂检测中的应用研究

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随着纳米科学的发展,一些纳米材料近年来被发现具有类似天然酶的活性,并且克服了天然酶稳定性差、成本高等缺点,这类纳米材料被定义为纳米酶。目前,已发现的纳米酶具有多种类酶活性,包括过氧化物酶、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶、氧化酶等,这些纳米酶已被广泛应用于生物医药、分析检测、食品和环境等领域。由于已发现的纳米酶多为过氧化物酶,多数研究也是关于这类材料,而其它种类纳米酶的研究及应用则相对较少,且其相关机理也尚不明了。本文主要研究了具有类氧化酶活性的两种纳米酶在抗氧化剂检测中的应用。首先,基于具有氧化酶活性的二氧化锰纳米片建立了一种快速比色检测抗氧化剂的方法。二氧化锰纳米片能够将无色的3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB)催化氧化成蓝色的氧化态TMB(ox TMB),ox TMB在652 nm处有一个特征吸收峰。抗氧化剂能够将二氧化锰纳米片还原成无类酶活性的二价锰离子,同时还能改变二氧化锰纳米片表面电荷抑制其类酶活性。以此为基础,建立652 nm处吸收值与抗氧化剂浓度的工作曲线实现了抗氧化剂的检测。此外,借助智能手机对样品颜色进行分析,我们还建立了一种便携的方法用于红酒中抗氧化剂总量的检测。其次,我们发展了一种简单的方法合成了羟基氧化钴纳米环,并发现它具有氧化酶性质。羟基氧化钴纳米环与酶底物的亲和力高于羟基氧化钴纳米片且高于辣根过氧化物酶(HRP)。由于抗氧化剂将环状的羟基氧化钴纳米结构破坏,并将其还原成没有活性的二价钴离子,从而使其类氧化酶活性降低。基于这一原理,我们构建了用光谱仪与智能手机分别检测茶叶中抗氧化剂含量的方法。最后,基于具有类氧化酶活性的羟基氧化钴纳米环,我们还建立了一种比色检测α-葡萄糖苷酶的方法。研究发现,抗坏血酸能够将羟基氧化钴纳米环还原为二价钴离子,从而抑制其类氧化酶活性,而α-葡萄糖苷酶能将L-抗坏血酸2-葡萄糖苷水解产生抗坏血酸。基于此原理,我们成功地对人血清中α-葡萄糖苷酶进行了检测,拓宽了羟基氧化钴纳米环的应用,并为α-葡萄糖苷酶的检测提供了新的途径。
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