【摘 要】
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研究背景:硫酸软骨素（CS）是一种重要的碳水化合物,它作为细胞外基质的主要成分之一,存在于人体各种组织中。它被证明具有多种有益的生物学效应,包括促进细胞的增殖,促进胶原蛋白生成,抑制细胞凋亡,下调炎症因子表达等。锌和镁均已被证明具有抑制炎症,促进组织再生的作用。其中锌还可以促进血管再生,抑制细菌生长等。镁还具有抑制软骨细胞凋亡,促进胶原再生等作用。研究目的:本课题拟从临床上常见的疾病（皮肤损伤和骨
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研究背景:硫酸软骨素（CS）是一种重要的碳水化合物,它作为细胞外基质的主要成分之一,存在于人体各种组织中。它被证明具有多种有益的生物学效应,包括促进细胞的增殖,促进胶原蛋白生成,抑制细胞凋亡,下调炎症因子表达等。锌和镁均已被证明具有抑制炎症,促进组织再生的作用。其中锌还可以促进血管再生,抑制细菌生长等。镁还具有抑制软骨细胞凋亡,促进胶原再生等作用。研究目的:本课题拟从临床上常见的疾病（皮肤损伤和骨性关节炎）出发,利用硫酸软骨素和金属阳离子镁和锌,合成的新的化合物材料硫酸软骨素锌和含镁的糖胺多糖。并验证它们抑制炎症促进组织再生的作用。研究方法:1.首先本研究利用离子交换的方法合成了新的化合物硫酸软骨素锌,并检测硫酸软骨素锌的理化特征。体外利用MTT实验,抑菌实验检测细胞活力和抑菌效果。利用qPCR检测与伤口愈合相关的基因的表达。2.选用雄性SD大鼠背部伤口模型,大体观察及取伤口部位皮肤进行常规组织学染色和免疫组化染色。3.首先合成硫酸软骨素镁,并对其理化特性进行鉴定。本课题组前期已经验证硫酸软骨素镁培养细胞最佳浓度0.144g/100mL。因此,通过适当的调整透明质酸钠的量进行分组,包括高浓度比例组（CSMg/HA 7.5:1）,HA为0.0192g/100mL、中等浓度比例组（CSMg/HA 7.5:0.5）,HA 为 0.0096g/100mL、低浓度比例组（CSMg/HA 7.5:0.26）,HA为0.0048g/100mL、更低浓度比例组（CSMg/HA 7.5:0.13）,HA 为 0.0024g/100mL、单纯硫酸软骨素镁组0.144g/100mL、空白组（单纯培养液组）。通过FTIR检测,以及MTT检测和qPCR检测细胞增殖和相关基因表达的情况,最终确定最适浓度比例。4.首先构造兔骨性关节炎模型,采用切断前交叉韧带的方法。随后关节腔注射药物。术后取材通过软骨大体形态观察,Micro-CT扫描检测软骨下骨,常规HE染色,番红固绿染色检测软骨再生修复情况。滑膜组织HE染色,软骨细胞凋亡荧光染色等检测治疗效果及可能的机制。实验结果:1.通过将锌与硫酸软骨素进行结合,我们成功合成硫酸软骨素锌,并且该材料具有抑制细菌生长,抑制炎症,促进胶原沉积和血管再生的作用。2.硫酸软骨素锌具有明显的促伤口愈合的作用。3.更低浓度比例的硫酸软骨素镁和透明质酸钠（CSMg/HA 7.5:0.13）混合而成的含镁糖胺多糖具有明显的促进软骨再生的作用和抑制炎症的作用。4.含镁糖胺多糖可以显著的抑制OA的进展,这和该材料抑制炎症和软骨细胞凋亡有关。研究结论:我们成功的合成了两种新型化合物材料,包括硫酸软骨素锌和含镁糖胺多糖,并验证了它们各自具有促进伤口愈合和显著的抑制骨性关节炎的作用。
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