脊髓灰质炎病毒(简称脊灰病毒)感染可引起急性肠道传染病脊髓灰质炎(简称脊灰),其主要病状为肢体麻痹、下肢发育不全和功能障碍,并造成终身残疾。脊髓灰质炎减毒活疫苗(Oral Polio Vaccine,OPV)和脊髓灰质炎灭活苗(Inactive Polio Vaccine,IPV)是主要的流行病学预防手段。但是,在使用OPV的国家发现了罕见的疫苗相关麻痹型脊灰和疫苗衍生脊灰病毒病例,这提示我们进一步加强对疫苗生产的质量控制力度十分必要,准确排查疑似脊灰患者的手段仍需加强。本研究旨在构建三型脊髓灰质炎病毒株(sabin I型、sabin II型和sabin III型)的假病毒颗粒Armored RNA-sab I、Armored RNA-sab II和Armored RNA-sab III,并以构建得到的假病毒颗粒作为实时荧光定量聚合酶链式反应(q RT-PCR)的阳性标准品,实现对待测样本中脊髓灰质炎病毒拷贝数的测定。本研究中使用PAR工程质粒作为载体,分别连接脊髓灰质炎病毒株sabin I型、sabin II型和sabin III型的特异基因片段sab I、sab II、sab III,得到的重组质粒转化后筛选阳性克隆。经鉴定的重组菌株在LB培养基中振荡培养、诱导后富集菌体,然后进行裂解和核酸酶处理,制备假病毒颗粒Armored RNA-sab I、Armored RNA-sab II和Armored RNA-sab III的粗提液。假病毒颗粒粗提液经核酸水平和蛋白质水平检测后,用来制作q RT-PCR标准曲线的标准品发挥其适用功能。