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目的:对中耳胆脂瘤上皮组织及对应的外耳道上皮组织中组蛋白H3K27me3的表达情况进行对比,并检测其中可能与组蛋白H3K27me3表达异常有关的因子,以探讨其在中耳胆脂瘤形成、进展过程中的意义,从而尝试在表观遗传层面对中耳胆脂瘤的发病机制进行阐述。方法:1、收集2018年10月到2019年6月青岛大学附属医院耳鼻喉科收治并确诊为胆脂瘤型中耳炎的患者35例,选取术中切除的新鲜胆脂瘤上皮组织为实验组,以同一患者对应的正常外耳道上皮组织为对照组。对35例胆脂瘤上皮组织及外耳道上皮组织分别进行Western blot检测H3K27me3的表达情况。2、同期收集上述患者实验组组织及同一患者的对照组组织各25例,通过组织冰冻切片OCT包埋剂包埋固定、冰冻、切片后应用组织免疫荧光染色技术对H3K27me3的表达进行定位及半定量检测。3、收集上述同一时间段内中耳胆脂患者实验组及对照组标本各15例,通过RT-qPCR技术检测实验组及对照组中EZH2,EZH1,KDM6A,TGM1,IVL基因mRNA的表达量,并进行相对定量分析。本研究使用ImageJ进行蛋白条带灰度值分析,统计分析软件使用SPSS 25.0。结果:1、Western blot结果显示中耳胆脂瘤上皮组织中H3K27me3的表达量低于外耳道上皮组织,统计分析显示中耳胆脂瘤上皮组织中的灰度值比值的均数±标准差为0.72±0.26,外耳道上皮组织中灰度值比值的均数±标准差为1.40±0.26,两者差异具有统计学意义(t=5.799,P<0.05)。2、免疫荧光染色显示H3K27me3主要表达于中耳胆脂瘤上皮细胞及外耳道上皮细胞的细胞核中,染色后表现为蓝染细胞核区域内的红染蛋白,且胆脂瘤上皮细胞中的表达量明显低于外耳道上皮细胞。3、RT-qPCR结果显示基因EZH2的mRNA在实验组中的相对表达量降低,t值为5.20,P=0.0003,P<0.001,差异具有统计学意义,表示中耳胆脂瘤组织中EZH2的表达水平相比于外耳道上皮组织降低;EZH1在实验组中的相对表达量降低,t值为2.23,P=0.038,P<0.05,差异具有统计学意义,表示中耳胆脂瘤组织中EZH1的表达水平相比于外耳道上皮组织降低;基因KDM6A,TGM1,IVL的表达则无明显差异。结论:中耳胆脂瘤上皮组织中H3K27me3的表达量低于外耳道上皮组织,其低表达可能参与了中耳胆脂瘤的形成及发展过程;H3K27me3在中耳胆脂瘤上皮细胞及外耳道上皮细胞中主要表达于细胞核中;在中耳胆脂瘤中EZH2,EZH1的基因表达量降低,这可能是影响H3K27me3表达下调的原因,也为中耳胆脂瘤的治疗提供可能的新靶点。