论文部分内容阅读
1、本研究对新疆尉犁县卡尔曲尕乡南部以及西南部(Kiyik河和Ugan河废弃古河道)天然胡杨林胡杨可培养内生酵母菌的多样性进行研究,采用富集培养法结合划线分离技术得到可培养内生酵母菌30株。结合酵母传统形态学观察及生理生化,核糖体rDNA D1/D2区序列分析和系统发育分析结果显示,30株菌分别属于2个门:担子菌门(Basidomycota)、子囊菌门(Ascomycota);其中24株分离菌株属于担子菌门,占80%,包括隐球酵母属(Cryptococcus)、线黑粉酵母属(Filobasidium)、红酵母属(Rhodotorula)、掷孢酵母属(Sporobolomyces)、毛孢子菌属(Trichosporon);6株属于子囊菌门,占20%,包括出芽短梗霉属(Aureobasidium)、假丝酵母属(Candida)。胡杨内生酵母菌中优势类群为隐球酵母属(15株)占50%,其次为出芽短梗霉属(5株)和掷孢酵母属(4株)分别占总分离菌株的16.7%和13.3%。其中,菌株P-10与ZA-3是隐球酵母属的两个潜在新种,它们与其系统进化地位最接近的模式菌株Cryptococcus aff.laurenti(iAY953961)和Cryptococcus laurentii(GQ352524)之间的26S rDNA D1/D2区序列相似性分别为95%,98%;ZA-8T是掷孢酵母属的潜在的新种,与其系统进化地位最接近的已知菌种Sporobolomyces nylandii (AB279629)之间的26SrDNA D1/D2区序列相似性为98%。本研究获得的胡杨可培养内生酵母菌显示出一定的多样性,蕴藏着开发利用价值的潜在新菌种资源。2、对分离到的潜在新种ZA-8T进行表型特征,生理生化特征及遗传型特征检测。结果:菌株ZA-8T菌落颜色为淡红色,细胞为卵圆形,无性生殖方式为出芽生殖,无子囊孢子。能生长在含0.01%的放线菌同培养基中。可利用的碳氮源有: L-苹果酸,磺琥珀酸, L-谷氨酸,α-酮戊二酸, D-葡萄酸,糊精,D-阿拉伯糖,D-纤维二塘,,龙胆二糖,α-D-葡萄糖,麦芽糖,D-甘露醇,D-木糖,β-甲基-D-葡萄糖苷,蔗糖,D-海藻糖,松二糖,熊果苷, D-核糖,水杨苷等。26S rDNA D1/D2区序列分析、系统发育分析结果表明,菌株ZA-8T归类于Sporobolomyces属,与其系统进化地位最接近的已知菌种Sporobolomycesnylandii (AB279629)之间的26S rDNA D1/D2区序列相似性为98%。基于表型特征、生理生化和遗传学上存在的差异,将菌株ZA-8T鉴定为是Sporobolomyces属的新种,命名为Sporobolomyces tograknsis。在基因库中ZA-8T核糖体大亚基26S rDNA D1/D2区序列注册号为HQ234294。3、对分离到的潜在新种KTH-63T进行多相分类学的鉴定。结果:菌株KTH-63T菌落颜色为米黄色,细胞为卵形,无芽孢,革兰氏阳性,无鞭毛,无运动性菌。菌株生长温度是10-40℃(最适30-37℃),pH范围是5.5-9.0(最适pH6.5-7.5),NaCl浓度范围是0-20%(w/v)(最适是0-3%)。具有氧化酶和过氧化氢酶活性,能利用碳源D-葡萄糖、D-棉子糖、D-蔗糖、D-麦芽糖和D-果糖。16SrRNA序列分析显示,菌株KTH-63T归类于葡萄球菌科(Staphylococcaceae),与其亲缘关系最近的模式菌株为Macrococcus brunensis CCM4811T,其序列同源性仅92.49%,基因组DNA的(G+C)mol%含量是34.1%。菌株KTH-63T主要包含的脂肪酸类型是anteiso-C15:0,iso-C16:0和iso-C14:0,分别占全细胞脂肪酸成分的41.06%,14.59%和8.07%,主要的醌型是MK-6。基于表型特征和系统发育分析,将菌株KTH-63T鉴定为是Staphylococcaceae科的新属新种,命名为Tarimoccocus tograknsis。菌株保藏编号是CCTCCAB2011010T和NRRLB-59557T。